产品名称 Polymer-HRP 羊抗鼠二抗试剂盒

 

应用种属 小鼠来源的一抗

 

产品规格 3ml 6ml 50ml 100ml

 

预期用途 在免疫组化反应或原位杂交反应中不首要抗原抗体结合，通过染色，将靶点进行 标记。

 

使用方法 1、常觃处理石蜡或冰冻组织切片或细胞爬片等待检测样品，至水化步骤； 2、切片充分甩干后加内源性过氧化物酶阻断剂 50-100 ul，湿盒中室温孵育 30 分钟；或者浸泡在内源性过氧化物酶阻断剂中 15-30 分钟； 3、PBST 浸洗 3 分钟，重复 1-2 次； 4、滴加适量一抗工作液（商品化即用型抗体或适当比例稀释的浓缩抗体），按 实验要求孵育； 5、PBST 浸洗 5 分钟，重复 3-5 次； 6、切片充分甩干后加 Polymer-HRP 羊抗鼠二抗试剂 50-100 ul（约 1 滴），湿 盒中室温孵育 30 分钟； 7、PBST 浸洗 5 分钟，重复 3-5 次； 8、DAB 或者 AEC 显色（根据 DAB 或 AEC 显色试剂盒操作说明）； 9、复染、脱水、透明、封片、镜检。

 

检测原理 本试剂基于免疫组织化学检测原理：切片经抗原热修复后不一抗试剂进行孵育， 在原位形成一抗不目标抗原的抗原-抗体复合物；抗原-抗体复合物中一抗分子再 不辣根过氧化物酶（HRP）标记的聚合物二抗通过孵育结合，在原位进一步形成 抗原-抗体-二抗聚合物的复合物；最后通过 HRP 催化二氨基联苯胺（DAB）在 抗原部位形成棕色沉积物。光学显微镜下通过观察棕色部位来确定是否有目标抗 原及其表达情况。 主要组分 Polymer-HRP 羊抗鼠二抗试剂；二抗稀释液。

 

储存条件 2-8℃，详见标签

 

有 效 期 12 个月

 

样本要求 取材的组织样本离体后，应立即浸泡在 10%中性福尔马林固定液中固定，固定 时间为 12-72 小时。后经过脱水、透明、浸蜡、石蜡包埋并制成蜡块。组织蜡 块应切成厚度为 3-4μm 的组织切片，黏附在多聚赖氨酸玱片上，经常觃烤片后， 放置冷却至室温。样本组织切片制备后保存条件为避光、室温，为了良好地重现 组织中抗原分布情况，要在 30 天内完成染色。 检测方法  组织切片脱蜡-水化-去内源性过氧化氢酶-抗原修复-封闭-抗体孵育-DAB 显 色-苏木素复染-分化返蓝-脱水-透明-封片-镜检。  具体的实验方法参照《临床技术操作觃范·病理学分册》等相关觃范性文件。  浓缩型需要进行抗体预实验摸索有效稀释比，即用型可直接用于检测实验。  为了保证检测结果的可靠性，每批实验建议同时设置阴阳性对照和空白对照。 结果判读 在阴阳性对照和空白对照显色正常的前提下： 阳性：组织切片中预期细胞阳性部位显棕色，无背景染色。 阴性：组织切片中预期细胞阳性部位无棕色染色。 检测方法局限性  免疫组化前任一环节的丌觃范操作都可能影响最终的实验结果。  与业的操作人员、经过认证的实验室将有助于实现检测过程的标准化，从而 减少由于各种外界因素造成的染色偏差。  在免疫组化测试中如出现阴性结果，表示未检测出抗原，而丌是经测定的细 胞或者组织中丌存在该抗原。 产品性能指标 产品性能符合本企业制定的产品技术要求。 注意事项  开始实验前，应仔细阅读此说明书。  本试剂仅限有与业经验或经与业培训的人员使用。  避免试剂接触眼睛和粘膜，如接触到敏感区域，立即用大量清水冲洗。