1 产品介绍

基因型：E. coli B F- dcm ompT hsdS(rB- mB-) gal [malB+]K-12(λS)

pUC19检测转化效率>108 cfu/μg DNA。

2 操作步骤：

2.1. 感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰水中水浴5分钟直至菌块融化，加入质粒或连接产物并用手拨打EP管底轻轻混匀(禁止用枪吸打)，冰水水浴30分钟。

2.2. 42℃水浴热激90s，迅速放回冰中并静置2分钟,禁止摇晃，否则会降低转化率。

2.3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (SOC或LB)，混匀后37℃，140 rpm 摇菌培养60分钟。

2.4. 取所有的菌悬液涂布到含相应抗生素的LB培养基上。

2.5. 将平板倒置放于35-37℃培养箱过夜培养。

3 注意事项：

3.1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。

3.2. 混入质粒时应轻柔操作。

3.3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。