一．产品简介

丰晖生物自主研发的成软骨诱导分化培养基，体外诱导MSCs向软骨细胞分化。该培养基包括促进MSCs向软骨分化的基础培养基，优质质量胎牛血清，所需的培养基添加物以及青链霉素。

二．包装组成成分

培养基名称	规格	保存方式	有效期
成软骨诱导分化培养基	200ml	避光，4℃	1个月

 

三．成软骨诱导分化操作规程：

1.      分离原代MSCs后，置于37℃，5%CO₂培养箱中培养，每2-3天换液或传代。

2.      建议使用低代次的MSCs（<8代，MSCs随着传代后代次的增加，多向潜能也逐渐降低）。细胞均匀分布，融合度达到80%时，用0.25%Trypsin-EDTA消化传代。

3.      收集细胞，按照5X10⁵cells/ml密度用37℃预热的软骨诱导培养基重悬，吸取0.5ml细胞悬液转移至15ml聚丙烯离心管中。

4.      将15ml离心管1500rpm离心5min，其目的将细胞离心至底部。拧松管盖，静置于37℃，5%CO₂培养箱中进行培养。

5.      培养24h-48h后观察细胞是否出现聚团现象，如有出现，轻弹管底使软骨球脱离管底悬浮培养。

6.      每隔2-3天进行换液，软骨诱导培养需要37℃预热，换液体积为0.5ml（换液需小心避开软骨球）。

7.      换液后轻弹管底，悬起软骨球，继续拧松管盖，37℃，5%CO₂培养箱中正常培养。

8.      培养28天左右，取出软骨球，进行固定、包埋、切片和甲苯胺蓝染色。

 

为避免成软骨诱导不成功或者分化效率低，请尽量保证MSCs纯度；不要将培养板长时间置于培养箱外观察或频繁开关培养箱；诱导培养基一定要预热；尽可能地避免晃动培养板；严格按照上述规程操作。

 

四．QC测试并证明诱导培养基有以下特性：

1.      包含了MSCs向成软骨方向分化需要的所有成分。

2.      实验比较同类产品，甲苯胺蓝染色证明其具有最佳诱导成软骨能力。

3.  无菌检测证明无细菌、真菌、支原体和无内毒素。

五. 产品使用注意事项：

1.         需避光，2-8℃保存，有效期为1个月。

2.         所有产品请于保质期内使用。

3.         产品使用前需37℃预热。

4.        产品使用时避光操作。

本产品仅用于科研用途，不可用于诊断、 治疗、 临床、 家庭及其他用途。