规格：5g

 

01/化学数据

分子式:C11H7N2NaO3S2

分子量:302.30 

中文名称:D-萤光素钠盐 

储存方式(自收到货起):

Pure form: -20℃ 3 年/4℃ 2 年 

In solvent (建议分装储备液，避免反复冻融！):-80℃ 2 年 /-20℃ 1 年 

 

02/溶解度和配方 

溶解度数据

体外(25°C） 

DMSO(吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响，请使用新开封的 DMSO)

100 mg/mL (330.80 mM) 50℃水浴

H2O(如您选择水作为储备液，请稀释至工作液后，再用 0.22 μm 的滤膜过滤除菌后使用)

250 mg/mL (826.99 mM) 50℃水浴

03/生物活性

生物活性:D-Luciferin sodium 是萤光素酶的天然底物，可催化生物发光昆虫产生光。该反应产生的 560 nm 化学发光在几秒钟内达到峰值， 当底物荧光素过量时，光输出与荧光素酶浓度成正比。荧光素酶 (luc) 基因是研究和活性分子筛选的常用报告基因。化学发光技术实 际上是无背景的，使得 luc 报告基因成为检测低水平基因表达的理想选择。在标准荧光计数仪中可以可靠地测量到 0.02 pg 的荧光  素酶。除了用于基因表达的外，荧光素酶还用于 ATP的检测。

产品类别:染料/荧光试剂；生化试剂

体外研究 (InVitro):D-Luciferin sodium 是酶荧光素酶 (Luc) 的天然底物，其催化萤火虫的典型黄绿色光的产生[1]

体内研究 (InVivo):使用萤火虫荧光素酶 (Fluc) 作为报告基因和 D-Luciferin sodium 作为底物的生物发光成像 (BLI) 是目前使用最广泛的技术。将总信 号强度相对于 D-Luciferin sodium 注射后的时间作图，以产生时间 - 强度曲线。除了峰值信号之外，在 D-Luciferin sodium 注射 后的固定时间点 (5、10、15 和 20分钟) 的信号被确定为峰值信号的替代。给定时间 - 强度曲线中的信号针对曲线中的峰值信号进  行归一化，以表示 D-Luciferin sodium 注射后的时间变化模式[2]

使用方法:操作指南（以下是丰晖生物的推荐方案。本方案仅提供指导原则，请根据您的具体实验进行修改)

1. 操作前注意事项 (仅供参考)

1.1 D-Luciferin sodium salt 在 100 mM 的水性缓冲液 (pH 6.1-6.5) 中易于溶解。储备溶液可在不含 ATP 的水中制成，并储存在 - 20°C 的温度下，以防光线照射。游离酸必须用适当的碱中和以溶解。在较高的 pH值下，D-Luciferin sodium salt 经历碱催化的  脱氢脲醛生成，以及外消旋成 L-异构体.

1.2 D-Luciferin sodium salt 可用于任何现有的报告基因检测或ATP 检测系统.

1.3 如果检测 ATP，需要戴手套和使用不含 ATP的容器，尽量减少所有可能的ATP 污染源。只使用无菌的不含 ATP的水和试剂。 所有试剂制剂使用蒸压水.

2. 实验操作 (仅供参考)

2.1 体外成像实验示例

a) 在无菌水中制备 100 mM (100-200X) D-Luciferin sodium salt 储备溶液 拌匀。立即使用或一次性等份使用，并在 -20°C 下储 存，避免冻融循环，避免暴露在阳光下.

b) 在预热过的组织培养液中配制 0.5-1 mM D-Luciferin sodium salt 工作液

c) 除去细胞中的培养基.

d) 在细胞中加入 D-Luciferin sodium salt 工作液，成像前 37°C 孵育细胞 5-10分钟.

2.2 体内成像实验示例

a) 在 DPBS 中制备 15 mg/mL D-Luciferin sodium salt 储备溶液，不含 Mg2+ 和 Ca2+ 拌匀.

b) 过滤器通过 0.2 μm 过滤器对溶液进行灭菌。立即使用，或一次性等份使用，并在 -20°C 下储存，避免冻融循环，避免暴露在阳 光下.

c) 成像前 10-15分钟，以 150 mg/kg (或 10 μL/g D-Luciferin sodium salt 储备溶液) 的动物体重腹腔注射 D-Luciferin sodium salt .

注：应为每个动物模型进行 D-Luciferin sodium salt 动力学研究，以确定峰值信号时间.

2.3 基因检测实验示例

a) 在无菌水中制备100 mM D-Luciferin sodium salt 储备溶液。立即使用，或一次性等份使用，并在 -20°C 下储存，避免冻融循 环，避免暴露在阳光下.

b) 在 25 mM tricine 缓冲液 (pH 7.8) 中制备含有 3 mM ATP、1 mM DTT 和 15 mM MgSO4 的 1 mM D-Luciferin sodium salt 工作溶液.

c) 用移液管将 5-10 μL细胞裂解液移到微孔板中。使用不含裂解物的裂解试剂或缓冲液作为空白对照.

d) 根据说明，使用 D-Luciferin sodium salt 工作溶液为光度计注入底部.

e) 立即注入 200 μL D-Luciferin sodium salt 工作溶液，结合时间为 10 s.

储存注意事项:密封，防潮，粉末避光保存，粉末溶成母液后也需避光保存。

04/参考文献

[1]. Giuseppe Meroni， et al. D-Luciferin， derivatives and analogues: synthesis and in vitro/in vivo luciferase-catalyzed bioluminescent activity. ARKIVOC 2009 (i) 265-288.

[2]. Inoue  Y，  et al. Timing of   imaging  after d-luciferin   injection  affects the   longitudinal assessment  of tumor growthusing   in  vivo bioluminescence imaging. IntJ Biomed Imaging. 2010;2010:471408.