• 规格： 冻干粉

简要介绍

 

菌种名 绿色荧光蛋白大肠杆菌

 

拉丁名 Escherichia coli

 　

基因型 eGFP 

 

特征 基因片段eGFP(GenBank: MH644048.1)，克隆进pET28a的Nde I和Xho I的位点，然后转化入BL21(DE3)菌种。可表达绿色荧光蛋白的大肠杆菌

 

保存 含30%甘油菌液放于-80度可长期保存

 

培养基 LB培养基（含50ug/mL的kana）

 

用途 用于表达绿色荧光蛋白

 

 

 

诱导方法

 

（1）LK液体培养基配方：胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L 酵母提取物(Yeast extract) 5g/L 氯化钠(NaCl) 10g/L ， 50ug/mL Kana，pH7.4 

 

（2）用接种环接种至3mL  LK液体培养基中37度，220rpm过夜培养至饱和。

 

（3）按照10%的接种量接种至100 mL LK培养基中37度培养至OD600=0.50，加入 1ml 100mM IPTG溶液，继续培养4小时。

 

（4）12000rpm，离心5min，收集菌体。