质粒接收后的处理方式:
1、 收到液体质粒后请5000rpm离心1min,若暂时不用可置于-20℃保存;
2、 取1-2μl质粒转化至50μl宿主菌感受态中,离心混匀后吸取部分悬液至含抗生素的LB固体平板上,37℃培养12-16h;
3、 挑取单菌落,接种于含对应抗生素的LB液体培养基中,37℃摇床培养12-16h,提取质粒并保存10%甘油菌,置于-20℃保存。
菌液接收后的处理方式:
1、 收到菌种后建议通过平板划线活化,挑取单菌落后接种于含对应抗生素的LB液体培养基中,37℃摇床培养12-16h,提取质粒并保存10%甘油菌,置于-20℃保存。
若需直接摇菌,建议取150μl甘油菌接种于1mL含有对应抗生素的LB液体培养基中,37℃摇床培养12-16h,次日再进行扩大培养,至合适体积进行质粒抽提。
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