• 规格：20μl质粒
• 原核抗性：氨苄青霉素Amp
• 筛选标记：潮霉素Hyg，博来霉素Zeo
• 克隆菌株：大肠杆菌Stbl3
• 质粒简介：           lentiMPH v2是一个哺乳Cas9表达质粒。
• 质粒图谱1： png/1-1G2050Z910226.png

质粒序列： 点击查看序列

LOCUS       Exported               11739 bp ds-DNA     circular SYN 04-DEC-2017

DEFINITION  synthetic circular DNA

FEATURES             Location/Qualifiers

     source          1..11739

                     /organism="synthetic DNA construct"

                     /mol_type="other DNA"

     misc_feature    488..613

                     /label=HIV-1 Psi

                     /note="packaging signal of human immunodeficiency virus 

                     type 1"

     LTR             660..840

                     /label=5' LTR (truncated)

                     /note="truncated 5' long terminal repeat (LTR) from HIV-1"

     promoter        complement(858..1056)

                     /label=CMV promoter

                     /note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early 

                     promoter"

     enhancer        1058..1437

                     /label=CMV enhancer

                     /note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"

     promoter        1703..1807

                     /gene="bla"

                     /label=AmpR promoter

     CDS             1808..2668

                     /codon_start=1

                     /gene="bla"

                     /product="beta-lactamase"

                     /label=AmpR

                     /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and

                     related antibiotics"

                     /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI

                     ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS

                     PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW

                     EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA

                     LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS

                     LIKHW"

     rep_origin      2839..3427

                     /direction=RIGHT

                     /label=ori

                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 

                     replication"

     polyA_signal    3878..3999

                     /label=SV40 poly(A) signal

                     /note="SV40 polyadenylation signal"

     CDS             complement(4129..4503)

                     /codon_start=1

                     /gene="Sh ble from Streptoalloteichus hindustanus"

                     /product="antibiotic-binding protein"

                     /label=Zeo

                     /note="confers resistance to bleomycin, phleomycin, and 

                     Zeocin(TM)"

                     /translation="MAKLTSAVPVLTARDVAGAVEFWTDRLGFSRDFVEDDFAGVVRDD

                     VTLFISAVQDQVVPDNTLAWVWVRGLDELYAEWSEVVSTNFRDASGPAMTEIGEQPWGR

                     EFALRDPAGNCVHFVAEEQD"

     promoter        complement(4522..4569)

                     /label=EM7 promoter

                     /note="synthetic bacterial promoter "

     promoter        complement(4617..4946)

                     /label=SV40 promoter

                     /note="SV40 enhancer and early promoter"

     rep_origin      4631..4766

                     /label=SV40 ori

                     /note="SV40 origin of replication"

     rep_origin      complement(4960..5388)

                     /direction=LEFT

                     /label=f1 ori

                     /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 

                     indicates direction of (+) strand synthesis"

     polyA_signal    5434..5658

                     /label=bGH poly(A) signal

                     /note="bovine growth hormone polyadenylation signal"

     LTR             5690..5870

                     /label=5' LTR (truncated)

                     /note="truncated 5' long terminal repeat (LTR) from HIV-1"

     promoter        6475..7653

                     /label=EF-1-alpha promoter

                     /note="strong constitutive promoter for human elongation 

                     factor EF-1-alpha"

     regulatory      7660..7669

                     /regulatory_class="other"

                     /note="vertebrate consensus sequence for strong initiation 

                     of translation (Kozak, 1987)"

     CDS             7669..8055

                     /codon_start=1

                     /product="bacteriophage MS2 coat protein"

                     /label=MS2-N55K

                     /note="binds with high affinity to a specific stem-loop 

                     structure in the viral RNA (Lim et al., 1994)"

                     /translation="ASNFTQFVLVDNGGTGDVTVAPSNFANGVAEWISSNSRSQAYKVT

                     CSVRQSSAQKRKYTIKVEVPKVATQTVGGVELPVAAWRSYLNMELTIPIFATNSDCELI

                     VKAMQGLLKDGNPIPSAIAANSGIY"

     CDS             8110..8130

                     /codon_start=1

                     /product="nuclear localization signal of SV40 (simian virus

                     40) large T antigen"

                     /label=SV40 NLS

                     /translation="PKKKRKV"

     CDS             8146..8688

                     /codon_start=1

                     /product="C-terminal portion of the p65 subunit of mouse 

                     NF-kappa-B"

                     /label=p65

                     /translation="PSGQISNQALALAPSSAPVLAQTMVPSSAMVPLAQPPAPAPVLTP

                     GPPQSLSAPVPKSTQAGEGTLSEALLHLQFDADEDLGALLGNSTDPGVFTDLASVDNSE

                     FQQLLNQGVSMSHSTAEPMLMEYPEAITRLVTGSQRPPDPAPTPLGTSGLPNGLSGDED

                     FSSIADMDFSALLSQISS"

     CDS             8713..9084

                     /codon_start=1

                     /product="C-terminal activation domain from the human heat 

                     shock transcription factor HSF1"

                     /label=HSF1

                     /translation="GFSVDTSALLDLFSPSVTVPDMSLPDLDSSLASIQELLSPQEPPR

                     PPEAENSSPDSGKQLVHYTAQPLFLLDPGSVDTGSNDLPVLFELGEGSYFSEGDGFAED

                     PTISLLTGSEPPKAKDPTVS"

     CDS             9100..9153

                     /codon_start=1

                     /product="2A peptide from Thosea asigna virus capsid 

                     protein"

                     /label=T2A

                     /note="Eukaryotic ribosomes fail to insert a peptide bond 

                     between the Gly and Pro residues, yielding separate 

                     polypeptides."

                     /translation="EGRGSLLTCGDVEENPGP"

     CDS             9157..10176

                     /codon_start=1

                     /product="hygromycin B phosphotransferase"

                     /label=HygR

                     /note="confers resistance to hygromycin"

                     /translation="MKKPELTATSVEKFLIEKFDSVSDLMQLSEGEESRAFSFDVGGRG

                     YVLRVNSCADGFYKDRYVYRHFASAALPIPEVLDIGEFSESLTYCISRRAQGVTLQDLP

                     ETELPAVLQPVAEAMDAIAAADLSQTSGFGPFGPQGIGQYTTWRDFICAIADPHVYHWQ

                     TVMDDTVSASVAQALDELMLWAEDCPEVRHLVHADFGSNNVLTDNGRITAVIDWSEAMF

                     GDSQYEVANIFFWRPWLACMEQQTRYFERRHPELAGSPRLRAYMLRIGLDQLYQSLVDG

                     NFDDAAWAQGRCDAIVRSGAGTVGRTQIARRSAAVWTDGCVEVLADSGNRRPSTRPRAK

                     "

     misc_feature    10216..10804

                     /label=WPRE

                     /note="woodchuck hepatitis virus posttranscriptional 

                     regulatory element"

     misc_feature    10857..10974

                     /label=cPPT/CTS

                     /note="central polypurine tract and central termination 

                     sequence of HIV-1"

     misc_feature    11501..11734

                     /label=RRE

                     /note="The Rev response element (RRE) of HIV-1 allows for 

                     Rev-dependent mRNA export from the nucleus to the 

                     cytoplasm."