• 规格：20μl质粒
• 启动子：nmt
• 原核抗性：氨苄青霉素Amp
• 克隆菌株：大肠杆菌DH5α
• 质粒简介：          pDUAL-HFG1酿酒酵母Gateway系统表达质粒，采用维生素B1抑制启动子nmt启动子。
• 质粒图谱1： png/1-1G222113506295.png

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LOCUS       Exported               10933 bp ds-DNA     circular SYN 22-DEC-2017

DEFINITION  synthetic circular DNA

FEATURES             Location/Qualifiers

     source          1..10933

                     /organism="synthetic DNA construct"

                     /mol_type="other DNA"

     misc_feature    36..1204

                     /label=nmt1 promoter

     protein_bind    1238..1362

                     /gene="mutant version of attR"

                     /label=attR1

                     /bound_moiety="LR Clonase(TM)"

                     /note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"

     promoter        1387..1417

                     /label=lac UV5 promoter

                     /note="E. coli lac promoter with an ""up"" mutation"

     CDS             1471..2151

                     /codon_start=1

                     /product="chloramphenicol acetyltransferase"

                     /label=CmR

                     /note="confers resistance to chloramphenicol"

                     /translation="MEKKITGYTTVDISQWHRKEHFEAFQSVAQCTYNQTVQLDITAFL

                     KTVKKNKHKFYPAFIHILARLMNAHPEFRMAMKDGELVIWDSVHPCYTVFHEQTETFSS

                     LWSEYHDDFRQFLHIYSQDVACYGENLAYFPKGFIENMFFVSANPWVSFTSFDLNVANM

                     DNFFAPVFTMGKYYTQGDKVLMPLAIQVHHAVCDGFHVGRMLNELQQYCDEWQAGRNLE

                     DPAY"

     CDS             2471..2776

                     /codon_start=1

                     /gene="ccdB"

                     /product="CcdB, a bacterial toxin that poisons DNA gyrase"

                     /label=ccdB

                     /note="Plasmids containing the ccdB gene cannot be 

                     propagated in standard E. coli strains."

                     /translation="MQFKVYTYKRESRYRLFVDVQSDIIDTPGRRMVIPLASARLLSDK

                     VPRELYPVVHIGDESWRMMTTDMASVPVSVIGEEVADLSHRENDIKNAINLMFWGI"

     protein_bind    complement(2817..2941)

                     /gene="mutant version of attR"

                     /label=attR2

                     /bound_moiety="LR Clonase(TM)"

                     /note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"

     CDS             2953..2976

                     /codon_start=1

                     /product="FLAG(R) epitope tag, followed by an enterokinase 

                     cleavage site"

                     /label=FLAG

                     /translation="DYKDDDDK"

     CDS             2983..3006

                     /codon_start=1

                     /product="FLAG(R) epitope tag, followed by an enterokinase 

                     cleavage site"

                     /label=FLAG

                     /translation="DYKDDDDK"

     CDS             3007..3024

                     /codon_start=1

                     /product="6xHis affinity tag"

                     /label=6xHis

                     /translation="HHHHHH"

     terminator      3069..3256

                     /gene="S. cerevisiae ADH1"

                     /label=ADH1 terminator

                     /note="transcription terminator for the S. cerevisiae 

                     alcohol dehydrogenase 1 (ADH1) gene"

     CDS             complement(4920..5714)

                     /codon_start=1

                     /gene="Schizosaccharomyces pombe ura4"

                     /product="orotidine 5'-phosphate decarboxylase, required 

                     for uracil biosynthesis"

                     /label=S. pombe ura4

                     /translation="MDARVFQSYSARAEGMKNPIAKELLALMEEKQSNLSVAVDLTKKS

                     EILELVDKIGPYVCVIKTHIDVVEDFDQDMVEKLVALGKKHRFLIFEDRKFADIGNTVK

                     LQYASGVYKIASWAHITNCHTVPGEGIIQGLKEVGLPLGRGLLLLAEMSSKGSLATGSY

                     TEKTLEWFEKHTDFCFGFIAGRRFPNLQSDYITMSPGIGLDVKGDGLGQQYRTPEEVIV

                     NCGSDIIIVGRGVYGAGRNPVVEAKRYREAGWKAYQQRLSQH"

     rep_origin      6323..7106

                     /label=ars1

                     /note="Schizosaccharomyces pombe autonomously replicating 

                     sequence ars1"

     rep_origin      8058..8513

                     /direction=RIGHT

                     /label=f1 ori

                     /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 

                     indicates direction of (+) strand synthesis"

     promoter        8795..8899

                     /gene="bla"

                     /label=AmpR promoter

     CDS             8900..9760

                     /codon_start=1

                     /gene="bla"

                     /product="beta-lactamase"

                     /label=AmpR

                     /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and

                     related antibiotics"

                     /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI

                     ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS

                     PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW

                     EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA

                     LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS

                     LIKHW"

     rep_origin      9931..10519

                     /direction=RIGHT

                     /label=ori

                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 

                     replication"

ORIGIN

        1 aagcttgcat gcctgcaggt cgatcgactc tagaggatca gaaaattatc gccataaaag

       61 acagaataag tcatcagcgg ttgtttcatt tcctatattt tttttttatt tttttatttt

      121 ttaataaggg aaaatttaac gtctaaggat acagaagatt gttagcacat taaagtaata

      181 aaggcttaag tagtaagtgc cttagcatgt tattgtattt caaaggacat aatctaaaat

      241 aataacaata tcatttctca caagttattc aattttcttt tttttttcta ataatatcaa

      301 gaatgtatta tttgtttgac ataagtcaac taatttattt aatatgctgg attaatcttg

      361 cagacatgta aattaacaag ttttagtcaa ataacgttga agtttcaatg aactcaaata

      421 atttctcttt ttttttatat aactctaatc tgatttatat tttccgcagg gatcaactga

      481 agttatgaca tttggattgg atcacttata accttggtcg ccaaataata caaaaatcag

      541 cgttataaaa caaagaaggt ttttgttaag aaattaatcc tctttcttga taagaaagtt

      601 gaaccgaaat tgcagatact gatatatgaa aataataccc acaattttgg gaatagcgca

      661 agcctcaatt taaacaatag gtgaggacac atgataatga cctcaatgat tgttagaaga

      721 aaagagcctc attacaaaat cgaaaaatga atggttgggt acaagtttcc aaaacatggt

      781 aaagtggact ttgcgtatga gacgtaaata gaaaaaaaca cttgttatat gttttctaga

      841 attattgttg tctctttatg gttggatgat gcaaaatagt aatttcggtt agttgctgta

      901 aaacaccacg agacaaatag atatggatat ttattaaatc aggaaaaacg taactctcgg

      961 ctactggatg gttcagtcac ccaacgatta ctggggagag aaaacagggc aaaagcaaag

     1021 cttaaaggaa tccgattgtc attcggcaat gtgcagcgaa actaaaaacc ggataatgga

     1081 cctgttaatc gaaacattga agatatataa aggaagagga atcctggcat atcatcaatt

     1141 gaataagttg aattaattat ttcaatctca ttctcacttt ctgacttata gtcgctttgt

     1201 taaagctagc gtcgacaggc ctggatccgg atatcaaaca agtttgtaca aaaaagctga

     1261 acgagaaacg taaaatgata taaatatcaa tatattaaat tagattttgc ataaaaaaca

     1321 gactacataa tactgtaaaa cacaacatat ccagtcacta tggcggccgc attaggcacc

     1381 ccaggcttta cactttatgc ttccggctcg tataatgtgt ggattttgag ttaggatccg

     1441 tcgagatttt caggagctaa ggaagctaaa atggagaaaa aaatcactgg atataccacc

     1501 gttgatatat cccaatggca tcgtaaagaa cattttgagg catttcagtc agttgctcaa

     1561 tgtacctata accagaccgt tcagctggat attacggcct ttttaaagac cgtaaagaaa

     1621 aataagcaca agttttatcc ggcctttatt cacattcttg cccgcctgat gaatgctcat

     1681 ccggaattcc gtatggcaat gaaagacggt gagctggtga tatgggatag tgttcaccct

     1741 tgttacaccg ttttccatga gcaaactgaa acgttttcat cgctctggag tgaataccac

     1801 gacgatttcc ggcagtttct acacatatat tcgcaagatg tggcgtgtta cggtgaaaac

     1861 ctggcctatt tccctaaagg gtttattgag aatatgtttt tcgtctcagc caatccctgg

     1921 gtgagtttca ccagttttga tttaaacgtg gccaatatgg acaacttctt cgcccccgtt

     1981 ttcaccatgg gcaaatatta tacgcaaggc gacaaggtgc tgatgccgct ggcgattcag

     2041 gttcatcatg ccgtttgtga tggcttccat gtcggcagaa tgcttaatga attacaacag

     2101 tactgcgatg agtggcaggc ggggcgtaat ctagaggatc cggcttacta aaagccagat

     2161 aacagtatgc gtatttgcgc gctgattttt gcggtataag aatatatact gatatgtata

     2221 cccgaagtat gtcaaaaaga ggtatgctat gaagcagcgt attacagtga cagttgacag

     2281 cgacagctat cagttgctca aggcatatat gatgtcaata tctccggtct ggtaagcaca

     2341 accatgcaga atgaagcccg tcgtctgcgt gccgaacgct ggaaagcgga aaatcaggaa

     2401 gggatggctg aggtcgcccg gtttattgaa atgaacggct cttttgctga cgagaacagg

     2461 ggctggtgaa atgcagttta aggtttacac ctataaaaga gagagccgtt atcgtctgtt

     2521 tgtggatgta cagagtgata ttattgacac gcccgggcga cggatggtga tccccctggc

     2581 cagtgcacgt ctgctgtcag ataaagtccc ccgtgaactt tacccggtgg tgcatatcgg

     2641 ggatgaaagc tggcgcatga tgaccaccga tatggccagt gtgccggtct ccgttatcgg

     2701 ggaagaagtg gctgatctca gccaccgcga aaatgacatc aaaaacgcca ttaacctgat

     2761 gttctgggga atataaatgt caggctccct tatacacagc cagtctgcag gtcgaccata

     2821 gtgactggat atgttgtgtt ttacagtatt atgtagtctg ttttttatgc aaaatctaat