• 规格：20μl质粒
• 原核抗性：氨苄青霉素Amp
• 筛选标记：遗传霉素G418
• 克隆菌株：大肠杆菌DH5α
• 质粒简介：           参考文献：Visualization of glutamine transporter activities in living cells using genetically encoded glutamine sensors. 
• 质粒图谱1： png/1-1P1141116425G.png

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LOCUS       Exported                7528 bp ds-DNA     circular SYN 14-JAN-2018

DEFINITION  synthetic circular DNA

FEATURES             Location/Qualifiers

     source          1..7528

                     /organism="synthetic DNA construct"

                     /mol_type="other DNA"

     enhancer        235..614

                     /label=CMV enhancer

                     /note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"

     promoter        615..818

                     /label=CMV promoter

                     /note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early 

                     promoter"

     promoter        863..881

                     /label=T7 promoter

                     /note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"

     CDS             1059..1766

                     /codon_start=1

                     /product="monomeric teal (cyan) fluorescent protein (Ai et 

                     al., 2006)"

                     /label=mTFP1

                     /note="mammalian codon-optimized"

                     /translation="MVSKGEETTMGVIKPDMKIKLKMEGNVNGHAFVIEGEGEGKPYDG

                     TNTINLEVKEGAPLPFSYDILTTAFAYGNRAFTKYPDDIPNYFKQSFPEGYSWERTMTF

                     EDKGIVKVKSDISMEEDSFIYEIHLKGENFPPNGPVMQKKTTGWDASTERMYVRDGVLK

                     GDVKHKLLLEGGGHHRVDFKTIYRAKKAVKLPDYHFVDHRIEILNHDKDYNKVTVYESA

                     VARNSTDGMDELYK"

     CDS             2841..3092

                     /codon_start=1

                     /product="C-terminal fragment of mVenus for use in 

                     bimolecular fluorescence complementation (BiFC) (Kodama and

                     Hu, 2010)"

                     /label=VC155

                     /translation="DKQKNGIKANFKIRHNIEDGGVQLADHYQQNTPIGDGPVLLPDNH

                     YLSYQSALSKDPNEKRDHMVLLEFVTAAGITLGMDELYK"

     polyA_signal    3128..3352

                     /label=bGH poly(A) signal

                     /note="bovine growth hormone polyadenylation signal"

     rep_origin      3398..3826

                     /direction=RIGHT

                     /label=f1 ori

                     /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 

                     indicates direction of (+) strand synthesis"

     promoter        3840..4169

                     /label=SV40 promoter

                     /note="SV40 enhancer and early promoter"

     rep_origin      4020..4155

                     /label=SV40 ori

                     /note="SV40 origin of replication"

     CDS             4236..5030

                     /codon_start=1

                     /gene="aph(3')-II (or nptII)"

                     /product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"

                     /label=Neo

                     /note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418 

                     (Geneticin(R))"

                     /translation="MIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGRP

                     VLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLLS

                     SHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPATCPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEHQ

                     GLAPAELFARLKARMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA

                     LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"

     polyA_signal    5204..5325

                     /label=SV40 poly(A) signal

                     /note="SV40 polyadenylation signal"

     rep_origin      complement(5776..6361)

                     /direction=LEFT

                     /label=ori

                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 

                     replication"

     CDS             complement(6532..7392)

                     /codon_start=1

                     /gene="bla"

                     /product="beta-lactamase"

                     /label=AmpR

                     /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and

                     related antibiotics"

                     /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI

                     ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS

                     PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW

                     EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA

                     LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS

                     LIKHW"

     promoter        complement(7393..7497)

                     /gene="bla"

                     /label=AmpR promoter

ORIGIN

        1 gacggatcgg gagatctccc gatcccctat ggtgcactct cagtacaatc tgctctgatg

       61 ccgcatagtt aagccagtat ctgctccctg cttgtgtgtt ggaggtcgct gagtagtgcg

      121 cgagcaaaat ttaagctaca acaaggcaag gcttgaccga caattgcatg aagaatctgc

      181 ttagggttag gcgttttgcg ctgcttcgcg atgtacgggc cagatatacg cgttgacatt

      241 gattattgac tagttattaa tagtaatcaa ttacggggtc attagttcat agcccatata

      301 tggagttccg cgttacataa cttacggtaa atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc

      361 cccgcccatt gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc

      421 attgacgtca atgggtggag tatttacggt aaactgccca cttggcagta catcaagtgt

      481 atcatatgcc aagtacgccc cctattgacg tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt

      541 atgcccagta catgacctta tgggactttc ctacttggca gtacatctac gtattagtca

      601 tcgctattac catggtgatg cggttttggc agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg

      661 actcacgggg atttccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc

      721 aaaatcaacg ggactttcca aaatgtcgta acaactccgc cccattgacg caaatgggcg

      781 gtaggcgtgt acggtgggag gtctatataa gcagagctct ctggctaact agagaaccca

      841 ctgcttactg gcttatcgaa attaatacga ctcactatag ggagacccaa gctggctagc

      901 gtttaaacgg gccctctaga ctcgagcggc cgccactgtg ctggatatct gcagaattcc

      961 accacactgg actagtggat ccactcgaga tggcaggctc gaaattagtt gtcgcgacgg

     1021 ataccgcctt cgttccgttc gaatttaaac aggccccaat ggtgagcaag ggcgaggaga

     1081 ccacaatggg cgtaatcaag cccgacatga agatcaagct gaagatggag ggcaacgtga

     1141 atggccacgc cttcgtgatc gagggcgagg gcgagggcaa gccctacgac ggcaccaaca

     1201 ccatcaacct ggaggtgaag gagggagccc ccctgccctt ctcctacgac attctgacca

     1261 ccgcgttcgc ctacggcaac agggccttca ccaagtaccc cgacgacatc cccaactact

     1321 tcaagcagtc cttccccgag ggctactctt gggagcgcac catgaccttc gaggacaagg

     1381 gcatcgtgaa ggtgaagtcc gacatctcca tggaggagga ctccttcatc tacgagatac

     1441 acctcaaggg cgagaacttc ccccccaacg gccccgtgat gcagaagaag accaccggct

     1501 gggacgcctc caccgagagg atgtacgtgc gcgacggcgt gctgaagggc gacgttaagc

     1561 acaagctgct gctggagggc ggcggccacc accgcgttga cttcaagacc atctacaggg

     1621 ccaagaaggc ggtgaagctg cccgactatc actttgtgga ccaccgcatc gagatcctga

     1681 accacgacaa ggactacaac aaggtgaccg tttacgagag cgccgtggcc cgcaactcca

     1741 ccgacggcat ggacgagctg tacaaggtga gcgccaaata tgtgggcttt gacgtcgatc

     1801 tgtgggctgc catcgctaaa gagctgaagc tggattacga actgaagccg atggatttca

     1861 gtgggatcat tccggcactg caaaccaaaa acgtcgatct ggcgctggcg ggcattacca

     1921 tcaccgacga gatgaaaaaa gcgatcgatt tctctgacgg ctacgccaaa agcggcctgt

     1981 tagtgatggt gaaagctaac aataacgatg tgaaaagcgt gaaagatctc gacgggaaag

     2041 tggttgctgt gaagagcggt actggctccg ttgattacgc gaaagcaaac atcaaaacta

     2101 aagatctgcg tcagttcccg aacatcgata acgcctatat ggaactgggc accaaccgcg

     2161 cagacgccgt tctgcacgat acgccaaaca ttctgtactt catcaaaacc gccggtaacg

     2221 gtcagttcaa agcggtaggt gactctctgg aagcgcagca atacggtatt gcgttcccga

     2281 aaggtagcga cgagctgcgt gacaaagtca acggcgcgtt gaaaaccctg cgcgagaacg

     2341 gaacttacaa cgaaatctac aaaaaatggt tcggtactga accgaaaggc gctgagctgt

     2401 tcaccggggt ggtgcccatc ctggtcgagc tggacggcga cgtaaacggc cacaagttca

     2461 gcgtgtccgg cgagggcgag ggcgatgcca cctacggcaa gctgaccctg aagctgatct

     2521 gcaccaccgg caagctgccc gtgccctggc ccaccctcgt gaccaccctg ggctacggcc

     2581 tgcagtgctt cgcccgctac cccgaccaca tgaagcagca cgacttcttc aagtccgcca

     2641 tgcccgaagg ctacgtccag gagcgcacca tcttcttcaa ggacgacggc aactacaaga

     2701 cccgcgccga ggtgaagttc gagggcgaca ccctggtgaa ccgcatcgag ctgaagggca

     2761 tcgacttcaa ggaggacggc aacatcctgg ggcacaagct ggagtacaac tacaacagcc

     2821 acaacgtcta tatcaccgcc gacaagcaga agaacggcat caaggccaac ttcaagatcc

     2881 gccacaacat cgaggacggc ggcgtgcagc tcgccgacca ctaccagcag aacaccccca

     2941 tcggcgacgg ccccgtgctg ctgcccgaca atcactacct gagctaccag tccgccctga

     3001 gcaaagaccc caacgagaag cgcgatcaca tggtcctgct ggagttcgtg accgccgccg

     3061 ggatcactct cggcatggac gagctgtaca agtaaaagct taagtttaaa ccgctgatca

     3121 gcctcgactg tgccttctag ttgccagcca tctgttgttt gcccctcccc cgtgccttcc

     3181 ttgaccctgg aaggtgccac tcccactgtc ctttcctaat aaaatgagga aattgcatcg

     3241 cattgtctga gtaggtgtca ttctattctg gggggtgggg tggggcagga cagcaagggg

     3301 gaggattggg aagacaatag caggcatgct ggggatgcgg tgggctctat ggcttctgag

     3361 gcggaaagaa ccagctgggg ctctaggggg tatccccacg cgccctgtag cggcgcatta

     3421 agcgcggcgg gtgtggtggt tacgcgcagc gtgaccgcta cacttgccag cgccctagcg

     3481 cccgctcctt tcgctttctt cccttccttt ctcgccacgt tcgccggctt tccccgtcaa

     3541 gctctaaatc gggggctccc tttagggttc cgatttagtg ctttacggca cctcgacccc

     3601 aaaaaacttg attagggtga tggttcacgt agtgggccat cgccctgata gacggttttt

     3661 cgccctttga cgttggagtc cacgttcttt aatagtggac tcttgttcca aactggaaca

     3721 acactcaacc ctatctcggt ctattctttt gatttataag ggattttgcc gatttcggcc

     3781 tattggttaa aaaatgagct gatttaacaa aaatttaacg cgaattaatt ctgtggaatg

     3841 tgtgtcagtt agggtgtgga aagtccccag gctccccagc aggcagaagt atgcaaagca

     3901 tgcatctcaa ttagtcagca accaggtgtg gaaagtcccc aggctcccca gcaggcagaa

     3961 gtatgcaaag catgcatctc aattagtcag caaccatagt cccgccccta actccgccca