• 规格：20μl质粒
• 原核抗性：氨苄青霉素Amp
• 筛选标记：遗传霉素G418,绿色荧光蛋白EGFP
• 克隆菌株：大肠杆菌DH5α
• 质粒简介：            pCDNA3.1-EGFP②是一个哺乳细胞绿色荧光表达质粒，
• 质粒图谱1： png/1-1G20Q54112b7.png

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LOCUS       Exported                6095 bp ds-DNA     circular SYN 08-DEC-2017

DEFINITION  synthetic circular DNA

FEATURES             Location/Qualifiers

     source          1..6095

                     /organism="synthetic DNA construct"

                     /mol_type="other DNA"

     enhancer        202..581

                     /label=CMV enhancer

                     /note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"

     promoter        582..785

                     /label=CMV promoter

                     /note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early 

                     promoter"

     promoter        830..848

                     /label=T7 promoter

                     /note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"

     CDS             902..1618

                     /codon_start=1

                     /product="enhanced GFP"

                     /label=EGFP

                     /note="mammalian codon-optimized"

                     /translation="MVSKGEELFTGVVPILVELDGDVNGHKFSVSGEGEGDATYGKLTL

                     KFICTTGKLPVPWPTLVTTLTYGVQCFSRYPDHMKQHDFFKSAMPEGYVQERTIFFKDD

                     GNYKTRAEVKFEGDTLVNRIELKGIDFKEDGNILGHKLEYNYNSHNVYIMADKQKNGIK

                     VNFKIRHNIEDGSVQLADHYQQNTPIGDGPVLLPDNHYLSTQSALSKDPNEKRDHMVLL

                     EFVTAAGITLGMDELYK"

     polyA_signal    1662..1886

                     /label=bGH poly(A) signal

                     /note="bovine growth hormone polyadenylation signal"

     rep_origin      1932..2360

                     /direction=RIGHT

                     /label=f1 ori

                     /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 

                     indicates direction of (+) strand synthesis"

     promoter        2374..2703

                     /label=SV40 promoter

                     /note="SV40 enhancer and early promoter"

     rep_origin      2554..2689

                     /label=SV40 ori

                     /note="SV40 origin of replication"

     CDS             2770..3564

                     /codon_start=1

                     /gene="aph(3')-II (or nptII)"

                     /product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"

                     /label=NeoR/KanR

                     /note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418 

                     (Geneticin(R))"

                     /translation="MIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGRP

                     VLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLLS

                     SHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPATCPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEHQ

                     GLAPAELFARLKARMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA

                     LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"

     polyA_signal    3738..3859

                     /label=SV40 poly(A) signal

                     /note="SV40 polyadenylation signal"

     protein_bind    3932..3948

                     /label=lac operator

                     /bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"

                     /note="The lac repressor binds to the lac operator to 

                     inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be 

                     relieved by adding lactose or 

                     isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."

     promoter        complement(3956..3986)

                     /label=lac promoter

                     /note="promoter for the E. coli lac operon"

     protein_bind    4001..4022

                     /label=CAP binding site

                     /bound_moiety="E. coli catabolite activator protein"

                     /note="CAP binding activates transcription in the presence 

                     of cAMP."

     rep_origin      complement(4310..4895)

                     /direction=LEFT

                     /label=ori

                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 

                     replication"

     CDS             complement(5066..5926)

                     /codon_start=1

                     /gene="bla"

                     /product="beta-lactamase"

                     /label=AmpR

                     /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and

                     related antibiotics"

                     /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI

                     ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS

                     PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW

                     EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA

                     LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS

                     LIKHW"

     promoter        complement(5927..6031)

                     /gene="bla"

                     /label=AmpR promoter

ORIGIN

        1 gcactctcag tacaatctgc tctgatgccg catagttaag ccagtatctg ctccctgctt

       61 gtgtgttgga ggtcgctgag tagtgcgcga gcaaaattta agctacaaca aggcaaggct

      121 tgaccgacaa ttgcatgaag aatctgctta gggttaggcg ttttgcgctg cttcgcgatg

      181 tacgggccag atatacgcgt tgacattgat tattgactag ttattaatag taatcaatta

      241 cggggtcatt agttcatagc ccatatatgg agttccgcgt tacataactt acggtaaatg

      301 gcccgcctgg ctgaccgccc aacgaccccc gcccattgac gtcaataatg acgtatgttc

      361 ccatagtaac gccaataggg actttccatt gacgtcaatg ggtggagtat ttacggtaaa

      421 ctgcccactt ggcagtacat caagtgtatc atatgccaag tacgccccct attgacgtca

      481 atgacggtaa atggcccgcc tggcattatg cccagtacat gaccttatgg gactttccta

      541 cttggcagta catctacgta ttagtcatcg ctattaccat ggtgatgcgg ttttggcagt

      601 acatcaatgg gcgtggatag cggtttgact cacggggatt tccaagtctc caccccattg

      661 acgtcaatgg gagtttgttt tggcaccaaa atcaacggga ctttccaaaa tgtcgtaaca

      721 actccgcccc attgacgcaa atgggcggta ggcgtgtacg gtgggaggtc tatataagca

      781 gagctctctg gctaactaga gaacccactg cttactggct tatcgaaatt aatacgactc

      841 actataggga gacccaagct ggctagcgtt taaacttaag cttggtaccg agctcggatc

      901 catggtgagc aagggcgagg agctgttcac cggggtggtg cccatcctgg tcgagctgga

      961 cggcgacgta aacggccaca agttcagcgt gtccggcgag ggcgagggcg atgccaccta

     1021 cggcaagctg accctgaagt tcatctgcac caccggcaag ctgcccgtgc cctggcccac

     1081 cctcgtgacc accctgacct acggcgtgca gtgcttcagc cgctaccccg accacatgaa

     1141 gcagcacgac ttcttcaagt ccgccatgcc cgaaggctac gtccaggagc gcaccatctt

     1201 cttcaaggac gacggcaact acaagacccg cgccgaggtg aagttcgagg gcgacaccct

     1261 ggtgaaccgc atcgagctga agggcatcga cttcaaggag gacggcaaca tcctggggca

     1321 caagctggag tacaactaca acagccacaa cgtctatatc atggccgaca agcagaagaa

     1381 cggcatcaag gtgaacttca agatccgcca caacatcgag gacggcagcg tgcagctcgc

     1441 cgaccactac cagcagaaca cccccatcgg cgacggcccc gtgctgctgc ccgacaacca

     1501 ctacctgagc acccagtccg ccctgagcaa agaccccaac gagaagcgcg atcacatggt

     1561 cctgctggag ttcgtgaccg ccgccgggat cactctcggc atggacgagc tgtacaagct

     1621 cgagtctaga gggcccgttt aaacccgctg atcagcctcg actgtgcctt ctagttgcca

     1681 gccatctgtt gtttgcccct cccccgtgcc ttccttgacc ctggaaggtg ccactcccac

     1741 tgtcctttcc taataaaatg aggaaattgc atcgcattgt ctgagtaggt gtcattctat

     1801 tctggggggt ggggtggggc aggacagcaa gggggaggat tgggaagaca atagcaggca

     1861 tgctggggat gcggtgggct ctatggcttc tgaggcggaa agaaccagct ggggctctag

     1921 ggggtatccc cacgcgccct gtagcggcgc attaagcgcg gcgggtgtgg tggttacgcg

     1981 cagcgtgacc gctacacttg ccagcgccct agcgcccgct cctttcgctt tcttcccttc

     2041 ctttctcgcc acgttcgccg gctttccccg tcaagctcta aatcgggggc tccctttagg

     2101 gttccgattt agtgctttac ggcacctcga ccccaaaaaa cttgattagg gtgatggttc

     2161 acgtagtggg ccatcgccct gatagacggt ttttcgccct ttgacgttgg agtccacgtt

     2221 ctttaatagt ggactcttgt tccaaactgg aacaacactc aaccctatct cggtctattc

     2281 ttttgattta taagggattt tgccgatttc ggcctattgg ttaaaaaatg agctgattta

     2341 acaaaaattt aacgcgaatt aattctgtgg aatgtgtgtc agttagggtg tggaaagtcc

     2401 ccaggctccc cagcaggcag aagtatgcaa agcatgcatc tcaattagtc agcaaccagg

     2461 tgtggaaagt ccccaggctc cccagcaggc agaagtatgc aaagcatgca tctcaattag

     2521 tcagcaacca tagtcccgcc cctaactccg cccatcccgc ccctaactcc gcccagttcc

     2581 gcccattctc cgccccatgg ctgactaatt ttttttattt atgcagaggc cgaggccgcc

     2641 tctgcctctg agctattcca gaagtagtga ggaggctttt ttggaggcct aggcttttgc

     2701 aaaaagctcc cgggagcttg tatatccatt ttcggatctg atcaagagac aggatgagga

     2761 tcgtttcgca tgattgaaca agatggattg cacgcaggtt ctccggccgc ttgggtggag

     2821 aggctattcg gctatgactg ggcacaacag acaatcggct gctctgatgc cgccgtgttc

     2881 cggctgtcag cgcaggggcg cccggttctt tttgtcaaga ccgacctgtc cggtgccctg

     2941 aatgaactgc aggacgaggc agcgcggcta tcgtggctgg ccacgacggg cgttccttgc

     3001 gcagctgtgc tcgacgttgt cactgaagcg ggaagggact ggctgctatt gggcgaagtg

     3061 ccggggcagg atctcctgtc atctcacctt gctcctgccg agaaagtatc catcatggct

     3121 gatgcaatgc ggcggctgca tacgcttgat ccggctacct gcccattcga ccaccaagcg

     3181 aaacatcgca tcgagcgagc acgtactcgg atggaagccg gtcttgtcga tcaggatgat

     3241 ctggacgaag agcatcaggg gctcgcgcca gccgaactgt tcgccaggct caaggcgcgc

     3301 atgcccgacg gcgaggatct cgtcgtgacc catggcgatg cctgcttgcc gaatatcatg

     3361 gtggaaaatg gccgcttttc tggattcatc gactgtggcc ggctgggtgt ggcggaccgc

     3421 tatcaggaca tagcgttggc tacccgtgat attgctgaag agcttggcgg cgaatgggct

     3481 gaccgcttcc tcgtgcttta cggtatcgcc gctcccgatt cgcagcgcat cgccttctat

     3541 cgccttcttg acgagttctt ctgagcggga ctctggggtt cgaaatgacc gaccaagcga

     3601 cgcccaacct gccatcacga gatttcgatt ccaccgccgc cttctatgaa aggttgg