• 规格：20μl质粒
• 启动子：CMV promoter
• 复制子：ori，F1 ori
• 终止子：bGH poly(A) signal
• 质粒分类：基因文库质粒；其它基因质粒；鱼源基因质粒
• 质粒大小：8058bp
• 质粒标签：N-3xFLAG，N-SV40 NLS，C-FokI cleavage domain
• 原核抗性：氨苄青霉素Amp（100μg/ml）
• 筛选标记：杀稻瘟菌素blast
• 克隆菌株：XL1 Blue等大肠杆菌
• 表达宿主：293T等哺乳细胞
• 备注：高拷贝质粒
• 质粒简介：               TAL3393质粒是一个表达斑马鱼基因的真核表达质粒，CMV promoter启动ZebrafishCommunity-vasa-right基因的表达。
                TAL3393质粒的参考文献是Targeted gene disruption in somatic zebrafish cells using engineered TALENs. 
• 质粒图谱1： png/1-1FQ614492A49.png

质粒序列： 点击查看序列

LOCUS       Exported                8058 bp ds-DNA    circular SYN 16-八月-2017

KEYWORDS    TAL3393

FEATURES             Location/Qualifiers

     source          1..8058

                     /organism="synthetic DNA construct"

                     /mol_type="other DNA"

     enhancer        235..614

                     /note="CMV enhancer"

                     /note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"

     promoter        615..818

                     /note="CMV promoter"

                     /note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early 

                     promoter"

     promoter        863..881

                     /note="T7 promoter"

                     /note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"

     CDS             907..972

                     /codon_start=1

                     /product="three tandem FLAG(R) epitope tags, followed by an

                     enterokinase cleavage site"

                     /note="3xFLAG"

                     /translation="DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK"

     CDS             979..999

                     /codon_start=1

                     /locus_tag="

                     "

                     /product="nuclear localization signal of SV40 large T 

                     antigen"

                     /note="SV40 NLS"

                     /note="

                     "

                     /protein_id="

                     "

                     /translation="PKKKRKV"

     misc_feature    1020..3312

                     /note="ZebrafishCommunity-vasa-right"

     CDS             3319..3906

                     /codon_start=1

                     /product="nonspecific DNA cleavage domain of the FokI 

                     endonuclease (Li et al., 1992)"

                     /note="FokI cleavage domain"

                     /note="must dimerize to be catalytically active"

                     /protein_id="

                     "

                     /translation="QLVKSELEEKKSELRHKLKYVPHEYIELIEIARNSTQDRILEMKV

                     MEFFMKVYGYRGKHLGGSRKPDGAIYTVGSPIDYGVIVDTKAYSGGYNLPIGQADEMQR

                     YVEENQTRNKHINPNEWWKVYPSSVTEFKFLFVSGHFKGNYKAQLTRLNHITNCNGAVL

                     SVEELLIGGEMIKAGTLTLEEVRRKFNNGEINF"

     polyA_signal    4019..4243

                     /note="bGH poly(A) signal"

                     /note="bovine growth hormone polyadenylation signal"

     rep_origin      4289..4717

                     /direction=RIGHT

                     /note="f1 ori"

                     /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 

                     indicates direction of (+) strand synthesis"

     promoter        4731..5061

                     /note="SV40 promoter"

                     /note="SV40 enhancer and early promoter"

     rep_origin      4912..5047

                     /note="SV40 ori"

                     /note="SV40 origin of replication"

     promoter        5109..5156

                     /note="EM7 promoter"

                     /note="synthetic bacterial promoter "

     CDS             5175..5573

                     /codon_start=1

                     /gene="Aspergillus terreus BSD"

                     /product="blasticidin S deaminase"

                     /note="Blast"

                     /note="confers resistance to blasticidin"

                     /translation="MAKPLSQEESTLIERATATINSIPISEDYSVASAALSSDGRIFTG

                     VNVYHFTGGPCAELVVLGTAAAAAAGNLTCIVAIGNENRGILSPCGRCRQVLLDLHPGI

                     KAIVKDSDGQPTAVGIRELLPSGYVWEG"

     polyA_signal    5731..5852

                     /note="SV40 poly(A) signal"

                     /note="SV40 polyadenylation signal"

     protein_bind    5925..5941

                     /bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"

                     /note="lac operator"

                     /note="The lac repressor binds to the lac operator to 

                     inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be 

                     relieved by adding lactose or 

                     isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."

     promoter        complement(5949..5979)

                     /note="lac promoter"

                     /note="promoter for the E. coli lac operon"

     protein_bind    5994..6015

                     /bound_moiety="E. coli catabolite activator protein"

                     /note="CAP binding site"

                     /note="CAP binding activates transcription in the presence 

                     of cAMP."

     rep_origin      complement(6303..6891)

                     /direction=LEFT

                     /note="ori"

                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 

                     replication"

     CDS             complement(7062..7922)

                     /codon_start=1

                     /gene="bla"

                     /product="beta-lactamase"

                     /note="AmpR"

                     /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and

                     related antibiotics"

                     /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI

                     ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS

                     PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW

                     EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA

                     LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS

                     LIKHW"

     promoter        complement(7923..8027)

                     /gene="bla"

                     /note="AmpR promoter"

ORIGIN

        1 gacggatcgg gagatctccc gatcccctat ggtcgactct cagtacaatc tgctctgatg

       61 ccgcatagtt aagccagtat ctgctccctg cttgtgtgtt ggaggtcgct gagtagtgcg

      121 cgagcaaaat ttaagctaca acaaggcaag gcttgaccga caattgcatg aagaatctgc

      181 ttagggttag gcgttttgcg ctgcttcgcg atgtacgggc cagatatacg cgttgacatt

      241 gattattgac tagttattaa tagtaatcaa ttacggggtc attagttcat agcccatata

      301 tggagttccg cgttacataa cttacggtaa atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc

      361 cccgcccatt gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc

      421 attgacgtca atgggtggac tatttacggt aaactgccca cttggcagta catcaagtgt

      481 atcatatgcc aagtacgccc cctattgacg tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt

      541 atgcccagta catgacctta tgggactttc ctacttggca gtacatctac gtattagtca

      601 tcgctattac catggtgatg cggttttggc agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg

      661 actcacgggg atttccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc

      721 aaaatcaacg ggactttcca aaatgtcgta acaactccgc cccattgacg caaatgggcg

      781 gtaggcgtgt acggtgggag gtctatataa gcagagctct ctggctaact agagaaccca

      841 ctgcttactg gcttatcgaa attaatacga ctcactatag ggagacccaa gctggctagc

      901 accatggact acaaagacca tgacggtgat tataaagatc atgacatcga ttacaaggat

      961 gacgatgaca agatggcccc caagaagaag aggaaggtgg gcattcaccg cggggtacct

     1021 atggtggact tgaggacact cggttattcg caacagcaac aggagaaaat caagcctaag

     1081 gtcaggagca ccgtcgcgca acaccacgag gcgcttgtgg ggcatggctt cactcatgcg

     1141 catattgtcg cgctttcaca gcaccctgcg gcgcttggga cggtggctgt caaataccaa

     1201 gatatgattg cggccctgcc cgaagccacg cacgaggcaa ttgtaggggt cggtaaacag

     1261 tggtcgggag cgcgagcact tgaggcgctg ctgactgtgg cgggtgagct tagggggcct

     1321 ccgctccagc tcgacaccgg gcagctgctg aagatcgcga agagaggggg agtaacagcg

     1381 gtagaggcag tgcacgcctg gcgcaatgcg ctcaccgggg cccccttgaa cctgacccca

     1441 gaccaggtag tcgcaatcgc gtcacatgac gggggaaagc aagccctgga aaccgtgcaa

     1501 aggttgttgc cggtcctttg tcaagaccac ggccttacac cggagcaagt cgtggccatt

     1561 gcatcccacg acggtggcaa acaggctctt gagacggttc agagacttct cccagttctc

     1621 tgtcaagccc acgggctgac tcccgatcaa gttgtagcga ttgcgtcgaa cattggaggg

     1681 aaacaagcat tggagactgt ccaacggctc cttcccgtgt tgtgtcaagc ccacggtttg

     1741 acgcctgcac aagtggtcgc catcgcctcc aatattggcg gtaagcaggc gctggaaaca

     1801 gtacagcgcc tgctgcctgt actgtgccag gatcatggac tgaccccaga ccaggtagtc

     1861 gcaatcgcgt cgaacattgg gggaaagcaa gccctggaaa ccgtgcaaag gttgttgccg

     1921 gtcctttgtc aagaccacgg ccttacaccg gagcaagtcg tggccattgc aagcaatggg

     1981 ggtggcaaac aggctcttga gacggttcag agacttctcc cagttctctg tcaagcccac

     2041 gggctgactc ccgatcaagt tgtagcgatt gcgtcgcatg acggagggaa acaagcattg

     2101 gagactgtcc aacggctcct tcccgtgttg tgtcaagccc acggtttgac gcctgcacaa

     2161 gtggtcgcca tcgccagcca tgatggcggt aagcaggcgc tggaaacagt acagcgcctg

     2221 ctgcctgtac tgtgccagga tcatggactg accccaga