• 规格：20μl质粒
• 启动子：ADH1 promoter
• 质粒大小：8981bp
• 原核抗性：卡那霉素Kan
• 筛选标记：TRP1
• 克隆菌株：DH5α大肠杆菌
• 质粒简介：        pGBKT7-GW质粒是一个用GateWay方法做克隆的酵母双杂交质粒。
• 质粒图谱1： png/1-1FR5160351963.png

质粒序列： 点击查看序列

LOCUS       Exported                8981 bp ds-DNA     circular SYN 11-OCT-2017

DEFINITION  synthetic circular DNA

ACCESSION   .

VERSION     .

KEYWORDS    .

SOURCE      synthetic DNA construct

  ORGANISM  synthetic DNA construct

REFERENCE   1  (bases 1 to 8981)

  AUTHORS   .

  TITLE     Direct Submission

            http://www.fenghbio.cn

FEATURES             Location/Qualifiers

     source          1..8981

                     /organism="synthetic DNA construct"

                     /mol_type="other DNA"

     promoter        30..734

                     /gene="S. cerevisiae ADH1"

                     /label=ADH1 promoter

                     /note="promoter for alcohol dehydrogenase 1"

     CDS             762..1202

                     /codon_start=1

                     /gene="Saccharomyces cerevisiae GAL4 (truncated)"

                     /product="DNA binding domain of the GAL4 transcriptional 

                     activator"

                     /label=GAL4 DNA binding domain

                     /translation="MKLLSSIEQACDICRLKKLKCSKEKPKCAKCLKNNWECRYSPKTK

                     RSPLTRAHLTEVESRLERLEQLFLLIFPREDLDMILKMDSLQDIKALLTGLFVQDNVNK

                     DAVTDRLASVETDMPLTLRQHRISATSSSEESSNKGQRQLTVS"

     promoter        1213..1231

                     /label=T7 promoter

                     /note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"

     CDS             1251..1280

                     /codon_start=1

                     /product="Myc (human c-Myc oncogene) epitope tag"

                     /label=Myc

                     /translation="EQKLISEEDL"

     protein_bind    1287..1411

                     /gene="mutant version of attR"

                     /label=attR1

                     /bound_moiety="LR Clonase(TM)"

                     /note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"

     promoter        1436..1466

                     /label=lac UV5 promoter

                     /note="E. coli lac promoter with an ""up"" mutation"

     CDS             1520..2179

                     /codon_start=1

                     /gene="cat"

                     /product="chloramphenicol acetyltransferase"

                     /label=CmR

                     /note="confers resistance to chloramphenicol"

                     /translation="MEKKITGYTTVDISQWHRKEHFEAFQSVAQCTYNQTVQLDITAFL

                     KTVKKNKHKFYPAFIHILARLMNAHPEFRMAMKDGELVIWDSVHPCYTVFHEQTETFSS

                     LWSEYHDDFRQFLHIYSQDVACYGENLAYFPKGFIENMFFVSANPWVSFTSFDLNVANM

                     DNFFAPVFTMGKYYTQGDKVLMPLAIQVHHAVCDGFHVGRMLNELQQYCDEWQGGA"

     CDS             2521..2826

                     /codon_start=1

                     /gene="ccdB"

                     /product="CcdB, a bacterial toxin that poisons DNA gyrase"

                     /label=ccdB

                     /note="Plasmids containing the ccdB gene cannot be 

                     propagated in standard E. coli strains."

                     /translation="MQFKVYTYKRESRYRLFVDVQSDIIDTPGRRMVIPLASARLLSDK

                     VSRELYPVVHIGDESWRMMTTDMASVPVSVIGEEVADLSHRENDIKNAINLMFWGI"

     protein_bind    complement(2867..2991)

                     /gene="mutant version of attR"

                     /label=attR2

                     /bound_moiety="LR Clonase(TM)"

                     /note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"

     terminator      3015..3062

                     /label=T7 terminator

                     /note="transcription terminator for bacteriophage T7 RNA 

                     polymerase"

     terminator      3089..3276

                     /gene="S. cerevisiae ADH1"

                     /label=ADH1 terminator

                     /note="transcription terminator for the S. cerevisiae 

                     alcohol dehydrogenase 1 (ADH1) gene"

     primer_bind     complement(3300..3316)

                     /label=M13 rev

                     /note="common sequencing primer, one of multiple similar 

                     variants"

     protein_bind    3324..3340

                     /label=lac operator

                     /bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"

                     /note="The lac repressor binds to the lac operator to 

                     inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be 

                     relieved by adding lactose or 

                     isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."

     promoter        complement(3348..3378)

                     /label=lac promoter

                     /note="promoter for the E. coli lac operon"

     protein_bind    3393..3414

                     /label=CAP binding site

                     /bound_moiety="E. coli catabolite activator protein"

                     /note="CAP binding activates transcription in the presence 

                     of cAMP."

     rep_origin      complement(3702..4290)

                     /direction=LEFT

                     /label=ori

                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 

                     replication"

     polyA_signal    4619..4666

                     /label=HSV TK poly(A) signal

                     /note="herpes simplex virus thymidine kinase 

                     polyadenylation signal (Cole and Stacy, 1985)"

     CDS             complement(4899..5693)

                     /codon_start=1

                     /gene="aph(3')-II (or nptII)"

                     /product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"

                     /label=Kan

                     /note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418 

                     (Geneticin(R))"

                     /translation="MIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGRP

                     VLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLLS

                     SHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPATCPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEHQ

                     GLAPAELFARLKASMPDGEDLVVTHDDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA

                     LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"

     promoter        complement(5694..5798)

                     /gene="bla"

                     /label=AmpR promoter

     rep_origin      5825..7167

                     /label=2u ori

                     /note="yeast 2u plasmid origin of replication"

     protein_bind    complement(6788..6835)

                     /label=FRT

                     /bound_moiety="FLP recombinase from the Saccharomyces 

                     cerevisiae 2u plasmid"

                     /note="FLP-mediated recombination occurs in the 8-bp core 

                     sequence TCTAGAAA (Turan and Bode, 2011)."

     promoter        7426..7707

                     /gene="S. cerevisiae TRP1"

                     /label=TRP1 promoter

     CDS             7708..8382

                     /codon_start=1

                     /gene="S. cerevisiae TRP1"

                     /product="phosphoribosylanthranilate isomerase, required 

                     for tryptophan biosynthesis"

                     /label=TRP1

                     /note="yeast auxotrophic marker"

                     /translation="MSVINFTGSSGPLVKVCGLQSTEAAECALDSDADLLGIICVPNRK

                     RTIDPVIARKISSLVKAYKNSSGTPKYLVGVFRNQPKEDVLALVNDYGIDIVQLHGDES

                     WQEYQEFLGLPVIKRLVFPKDCNILLSAASQKPHSFIPLFDSEAGGTGELLDWNSISDW

                     VGRQESPESLHFMLAGGLTPENVGDALRLNGVIGVDVSGGVETNGVKDSNKIANFVKNA

                     KK"

     rep_origin      complement(8485..8940)

                     /direction=LEFT

                     /label=f1 ori

                     /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 

                     indicates direction of (+) strand synthesis"

ORIGIN