• 规格：20μl质粒
• 启动子：GAP
• 复制子：pUC ori
• 终止子：AOX1 TT
• 质粒大小：3251bp
• 质粒标签：C-Myc, C-6×His
• 原核抗性：Zeo
• 筛选标记：博来霉素Zeo
• 克隆菌株：DH5α
• 表达宿主：酵母细胞
• 5测序引物：pGAP-F:GTCCCTATTTCAATCAATTGAA
• 3测序引物：AOX3:GGCAAATGGCATTCTGACAT
• 质粒简介：     甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）的酶在许多生物细胞中包括毕赤酵母，稳定高水平表达。最近GAPDH蛋白编码基因启动子（GAP）被深入研究，并在毕赤酵母中能够高水表达重组蛋白，这取决于使用的碳源（Waterham等 人，，1997）。GAP启动子（PGAP）的重组蛋白表达水平略高于AOX1启动子。
     pGAPZ A，B，和C载体（2.9 KB）和pGAPZαB和C（3.1 KB）载体使用GAP启动子在毕赤酵母中稳定表达重组蛋白。重组蛋白表达为为带有C-末端myc抗原表位和C端His标签的融合蛋白。此外，pGAPZα 表达的融合蛋白在N-端带有酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）的α-因子分泌信号肽。这两个系列的载体都提供三个不同读码框的载体，以方便克隆的带有C-端标签和/或N-末端分泌信号肽的载体中。
  
• 质粒图谱1： png/4-16091014260V35.png

质粒序列： 点击查看序列

LOCUS       Exported                3152 bp ds-DNA     circular SYN 10-SEP-2016

DEFINITION  synthetic circular DNA

KEYWORDS    Untitled 14

SOURCE      synthetic DNA construct

  ORGANISM  synthetic DNA construct

REFERENCE   1  (bases 1 to 3152)

  AUTHORS   .

  TITLE     Direct Submission

  JOURNAL   Exported Saturday, September 10, 2016 from SnapGene Viewer 3.1.4

            http://www.fenghbio.cn

FEATURES             Location/Qualifiers

     source          1..3152

                     /organism="synthetic DNA construct"

                     /mol_type="other DNA"

     promoter        7..483

                     /note="GAP promoter"

                     /note="promoter for Pichia pastoris 

                     glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase"

     CDS             832..861

                     /codon_start=1

                     /product="Myc (human c-Myc oncogene) epitope tag"

                     /note="Myc"

                     /translation="EQKLISEEDL"

     CDS             877..894

                     /codon_start=1

                     /product="6xHis affinity tag"

                     /note="6xHis"

                     /translation="HHHHHH"

     terminator      973..1219

                     /gene="Pichia pastoris AOX1"

                     /note="AOX1 terminator"

                     /note="transcription terminator for AOX1"

     promoter        1234..1645

                     /gene="S. cerevisiae TEF1"

                     /note="TEF1 promoter"

                     /note="promoter for EF-1-alpha"

     promoter        1652..1699

                     /note="EM7 promoter"

                     /note="synthetic bacterial promoter "

     CDS             1718..2092

                     /codon_start=1

                     /gene="Sh ble from Streptoalloteichus hindustanus"

                     /product="antibiotic-binding protein"

                     /note="BleoR"

                     /note="confers resistance to bleomycin, phleomycin, and 

                     Zeocin(TM)"

                     /translation="MAKLTSAVPVLTARDVAGAVEFWTDRLGFSRDFVEDDFAGVVRDD

                     VTLFISAVQDQVVPDNTLAWVWVRGLDELYAEWSEVVSTNFRDASGPAMTEIGEQPWGR

                     EFALRDPAGNCVHFVAEEQD"

     terminator      2158..2405

                     /gene="S. cerevisiae CYC1"

                     /note="CYC1 terminator"

                     /note="transcription terminator for CYC1"

     rep_origin      complement(2480..3068)

                     /direction=LEFT

                     /note="ori"

                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 

                     replication"

ORIGIN

        1 agatcttttt tgtagaaatg tcttggtgtc ctcgtccaat caggtagcca tctctgaaat

       61 atctggctcc gttgcaactc cgaacgacct gctggcaacg taaaattctc cggggtaaaa

      121 cttaaatgtg gagtaatgga accagaaacg tctcttccct tctctctcct tccaccgccc

      181 gttaccgtcc ctaggaaatt ttactctgct ggagagcttc ttctacggcc cccttgcagc

      241 aatgctcttc ccagcattac gttgcgggta aaacggaggt cgtgtacccg acctagcagc

      301 ccagggatgg aaaagtcccg gccgtcgctg gcaataatag cgggcggacg catgtcatga

      361 gattattgga aaccaccaga atcgaatata aaaggcgaac acctttccca attttggttt

      421 ctcctgaccc aaagacttta aatttaattt atttgtccct atttcaatca attgaacaac

      481 tatttcgaaa cgatgagatt tccttcaatt tttactgctg ttttattcgc agcatcctcc

      541 gcattagctg ctccagtcaa cactacaaca gaagatgaaa cggcacaaat tccggctgaa

      601 gctgtcatcg gttactcaga tttagaaggg gatttcgatg ttgctgtttt gccattttcc

      661 aacagcacaa ataacgggtt attgtttata aatactacta ttgccagcat tgctgctaaa

      721 gaagaagggg tatctctcga gaagagagag gctgaagcat cgatgaattc acgtggccca

      781 gccggccgtc tcggatcggt acctcgagcc gcggcggccg ccagctttct agaacaaaaa

      841 ctcatctcag aagaggatct gaatagcgcc gtcgaccatc atcatcatca tcattgagtt

      901 ttagccttag acatgactgt tcctcagttc aagttgggca cttacgagaa gaccggtctt

      961 gctagattct aatcaagagg atgtcagaat gccatttgcc tgagagatgc aggcttcatt

     1021 tttgatactt ttttatttgt aacctatata gtataggatt ttttttgtca ttttgtttct

     1081 tctcgtacga gcttgctcct gatcagccta tctcgcagct gatgaatatc ttgtggtagg

     1141 ggtttgggaa aatcattcga gtttgatgtt tttcttggta tttcccactc ctcttcagag

     1201 tacagaagat taagtgagac cttcgtttgt gcggatcccc cacacaccat agcttcaaaa

     1261 tgtttctact ccttttttac tcttccagat tttctcggac tccgcgcatc gccgtaccac

     1321 ttcaaaacac ccaagcacag catactaaat tttccctctt tcttcctcta gggtgtcgtt

     1381 aattacccgt actaaaggtt tggaaaagaa aaaagagacc gcctcgtttc tttttcttcg

     1441 tcgaaaaagg caataaaaat ttttatcacg tttctttttc ttgaaatttt tttttttagt

     1501 ttttttctct ttcagtgacc tccattgata tttaagttaa taaacggtct tcaatttctc

     1561 aagtttcagt ttcatttttc ttgttctatt acaacttttt ttacttcttg ttcattagaa

     1621 agaaagcata gcaatctaat ctaagggcgg tgttgacaat taatcatcgg catagtatat

     1681 cggcatagta taatacgaca aggtgaggaa ctaaaccatg gccaagttga ccagtgccgt

     1741 tccggtgctc accgcgcgcg acgtcgccgg agcggtcgag ttctggaccg accggctcgg

     1801 gttctcccgg gacttcgtgg aggacgactt cgccggtgtg gtccgggacg acgtgaccct

     1861 gttcatcagc gcggtccagg accaggtggt gccggacaac accctggcct gggtgtgggt

     1921 gcgcggcctg gacgagctgt acgccgagtg gtcggaggtc gtgtccacga acttccggga

     1981 cgcctccggg ccggccatga ccgagatcgg cgagcagccg tgggggcggg agttcgccct

     2041 gcgcgacccg gccggcaact gcgtgcactt cgtggccgag gagcaggact gacacgtccg

     2101 acggcggccc acgggtccca ggcctcggag atccgtcccc cttttccttt gtcgatatca

     2161 tgtaattagt tatgtcacgc ttacattcac gccctccccc cacatccgct ctaaccgaaa

     2221 aggaaggagt tagacaacct gaagtctagg tccctattta tttttttata gttatgttag

     2281 tattaagaac gttatttata tttcaaattt ttcttttttt tctgtacaga cgcgtgtacg

     2341 catgtaacat tatactgaaa accttgcttg agaaggtttt gggacgctcg aaggctttaa

     2401 tttgcaagct ggagaccaac atgtgagcaa aaggccagca aaaggccagg aaccgtaaaa

     2461 aggccgcgtt gctggcgttt ttccataggc tccgcccccc tgacgagcat cacaaaaatc

     2521 gacgctcaag tcagaggtgg cgaaacccga caggactata aagataccag gcgtttcccc

     2581 ctggaagctc cctcgtgcgc tctcctgttc cgaccctgcc gcttaccgga tacctgtccg

     2641 cctttctccc ttcgggaagc gtggcgcttt ctcaatgctc acgctgtagg tatctcagtt

     2701 cggtgtaggt cgttcgctcc aagctgggct gtgtgcacga accccccgtt cagcccgacc

     2761 gctgcgcctt atccggtaac tatcgtcttg agtccaaccc ggtaagacac gacttatcgc

     2821 cactggcagc agccactggt aacaggatta gcagagcgag gtatgtaggc ggtgctacag

     2881 agttcttgaa gtggtggcct aactacggct acactagaag gacagtattt ggtatctgcg

     2941 ctctgctgaa gccagttacc ttcggaaaaa gagttggtag ctcttgatcc ggcaaacaaa

     3001 ccaccgctgg tagcggtggt ttttttgttt gcaagcagca gattacgcgc agaaaaaaag

     3061 gatctcaaga agatcctttg atcttttcta cggggtctga cgctcagtgg aacgaaaact

     3121 cacgttaagg gattttggtc atgcatgaga tc

//