• 规格：20μl质粒
• • 质粒宿主：  大肠杆菌
  • 质粒用途：  蛋白表达
  • 片段类型：  ORF
  • 片段物种：  蛋白酶
  • 原核抗性：  Amp
  • 筛选标记：  
  • 荧光标记：  
  • 启动子:  T7
  • 复制子:  
  • 拷贝数:  
  • 感受态:  DH5a
  • 温度:  37度
  • 背景载体:  
  • 正向引物:  T7：TAATACGACTCACTATAGGG
  • 反向引物:  T7ter：TGCTAGTTATTGCTCAGCGG
  • 诱导方式:  
• 质粒图谱1： png/1-1F926110326405.png

质粒序列： 点击查看序列

LOCUS       Exported                8033 bp ds-DNA     circular SYN 26-SEP-2017

DEFINITION  synthetic circular DNA

ACCESSION   .

VERSION     .

KEYWORDS    .

SOURCE      synthetic DNA construct

  ORGANISM  synthetic DNA construct

REFERENCE   1  (bases 1 to 8033)

  AUTHORS   .

  TITLE     Direct Submission

  JOURNAL   Exported Sep 26, 2017 from MiaoLingPlasmid

            http://www.fenghbio.cn

FEATURES             Location/Qualifiers

     source          1..8033

                     /organism="synthetic DNA construct"

                     /mol_type="other DNA"

     misc_feature    5..144

                     /label=bom

                     /note="basis of mobility region from pBR322"

     CDS             complement(246..437)

                     /codon_start=1

                     /gene="rop"

                     /product="Rop protein, which maintains plasmids at low copy

                     number"

                     /label=rop

                     /translation="MTKQEKTALNMARFIRSQTLTLLEKLNELDADEQADICESLHDHA

                     DELYRSCLARFGDDGENL"

     misc_feature    complement(1749..2831)

                     /label=lacI

     promoter        complement(2832..2909)

                     /gene="lacI"

                     /label=lacI promoter

     promoter        3218..3236

                     /label=T7 promoter

                     /note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"

     protein_bind    3237..3261

                     /label=lac operator

                     /bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"

                     /note="The lac repressor binds to the lac operator to 

                     inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be 

                     relieved by adding lactose or 

                     isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."

     RBS             3276..3298

                     /note="efficient ribosome binding site from bacteriophage 

                     T7 gene 10 (Olins and Rangwala, 1989)"

     CDS             3311..3340

                     /codon_start=1

                     /product="10xHis affinity tag"

                     /label=10xHis

                     /translation="HHHHHHHHHH"

     CDS             3353..3364

                     /codon_start=1

                     /product="Factor Xa recognition and cleavage site"

                     /label=Factor Xa site

                     /translation="IEGR"

     CDS             3368..5695

                     /codon_start=1

                     /label=Pfu

                     /translation="MILDVDYITEEGKPVIRLFKKENGKFKIEHDRTFRPYIYALLRDD

                     SKIEEVKKITGERHGKIVRIVDVEKVEKKFLGKPITVWKLYLEHPQDVPTIREKVREHP

                     AVVDIFEYDIPFAKRYLIDKGLIPMEGEEELKILAFDIETLYHEGEEFGKGPIIMISYA

                     DENEAKVITWKNIDLPYVEVVSSEREMIKRFLRIIREKDPDIIVTYNGDSFDFPHLAKR

                     AEKLGIKLTIGRDGSEPKMQRIGDMTAVEVKGRIHFDLYHVITRTINLPTYTLEAVYEA

                     IFGKPKEKVYADEIAKAWESGENLERVAKYSMEDAKATYELGKEFLPMEIQLSRLVGQP

                     LWDVSRSSTGNLVEWFLLRKAYERNEVAPNKPSEEEYQRRLRESYTGGFVKEPEKGLWE

                     NIVYLDFRALYPSIIITHNVSPDTLNLEGCKNYDIAPQVGHKFCKDIPGFIPSLLGHLL

                     EERRKIKTKMKETQDPIEKILLDYRQKAIKLLANSFYGYYGYAKARWYCKECAESVTAW

                     GRKYIELVWKELEEKLGFKVLYIDTDGLYATIPGGESEEIKIKALEFVKYINSKLPGLL

                     ELEYEGFYKRGFFVTKKRYAVIDEEGKVITRGLEIVRRDWSEIAKETQARVLETILKHG

                     DVEEAVRIVKEVIQKLANYEIPPEKLAIYEQITRPLHEYKAIGPHVAAAKKLAAKGVKI

                     KPGMVIGYIVLRGDGPISNRAILAEEYDPKKHKYDAEYYIENQVLPAVLRILEGFGYRK

                     EDLRYQKTRQVGLTSWLNIKKS"

     terminator      5765..5812

                     /label=T7 terminator

                     /note="transcription terminator for bacteriophage T7 RNA 

                     polymerase"

     promoter        6128..6232

                     /gene="bla"

                     /label=AmpR promoter

     CDS             6233..7093

                     /codon_start=1

                     /gene="bla"

                     /product="beta-lactamase"

                     /label=AmpR

                     /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and

                     related antibiotics"

                     /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI

                     ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRVDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS

                     PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW

                     EPELNEAIPNDERDTTMPAAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA

                     LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS

                     LIKHW"

     rep_origin      7264..7852

                     /direction=RIGHT

                     /label=ori

                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 

                     replication"

ORIGIN

        1 agcgcctgat gcggtatttt ctccttacgc atctgtgcgg tatttcacac cgcaatggtg

       61 cactctcagt acaatctgct ctgatgccgc atagttaagc cagtatacac tccgctatcg

      121 ctacgtgact gggtcatggc tgcgccccga cacccgccaa cacccgctga cgcgccctga

      181 cgggcttgtc tgctcccggc atccgcttac agacaagctg tgaccgtctc cgggagctgc

      241 atgtgtcaga ggttttcacc gtcatcaccg aaacgcgcga ggcagctgcg gtaaagctca

      301 tcagcgtggt cgtgaagcga ttcacagatg tctgcctgtt catccgcgtc cagctcgttg

      361 agtttctcca gaagcgttaa tgtctggctt ctgataaagc gggccatgtt aagggcggtt

      421 ttttcctgtt tggtcactga tgcctccgtg taagggggat ttctgttcat gggggtaatg

      481 ataccgatga aacgagagag gatgctcacg atacgggtta ctgatgatga acatgcccgg

      541 ttactggaac gttgtgaggg taaacaactg gcggtatgga tgcggcggga ccagagaaaa

      601 atcactcagg gtcaatgcca gcgcttcgtt aatacagatg taggtgttcc acagggtagc

      661 cagcagcatc ctgcgatgca gatccggaac ataatggtgc agggcgctga cttccgcgtt

      721 tccagacttt acgaaacacg gaaaccgaag accattcatg ttgttgctca ggtcgcagac

      781 gttttgcagc agcagtcgct tcacgttcgc tcgcgtatcg gtgattcatt ctgctaacca

      841 gtaaggcaac cccgccagcc tagccgggtc ctcaacgaca ggagcacgat catgcgcacc

      901 cgtggccagg acccaacgct gcccgagatg cgccgcgtgc ggctgctgga gatggcggac

      961 gcgatggata tgttctgcca agggttggtt tgcgcattca cagttctccg caagaattga

     1021 ttggctccaa ttcttggagt ggtgaatccg ttagcgaggt gccgccggct tccattcagg

     1081 tcgaggtggc ccggctccat gcaccgcgac gcaacgcggg gaggcagaca aggtataggg

     1141 cggcgcctac aatccatgcc aacccgttcc atgtgctcgc cgaggcggca taaatcgccg

     1201 tgacgatcag cggtccaatg atcgaagtta ggctggtaag agccgcgagc gatccttgaa

     1261 gctgtccctg atggtcgtca tctacctgcc tggacagcat ggcctgcaac gcgggcatcc

     1321 cgatgccgcc ggaagcgaga agaatcataa tggggaaggc catccagcct cgcgtcgcga

     1381 acgccagcaa gacgtagccc agcgcgtcgg ccgccatgcc ggcgataatg gcctgcttct

     1441 cgccgaaacg tttggtggcg ggaccagtga cgaaggcttg agcgagggcg tgcaagattc

     1501 cgaataccgc aagcgacagg ccgatcatcg tcgcgctcca gcgaaagcgg tcctcgccga

     1561 aaatgaccca gagcgctgcc ggcacctgtc ctacgagttg catgataaag aagacagtca

     1621 taagtgcggc gacgatagtc atgccccgcg cccaccggaa ggagctgact gggttgaagg

     1681 ctctcaaggg catcggtcga gatcccggtg cctaatgagt gagctaactt acattaattg

     1741 cgttgcgctc actgcccgct ttccagtcgg gaaacctgtc gtgccagctg cattaatgaa

     1801 tcggccaacg cgcggggaga ggcggtttgc gtattgggcg ccagggtggt ttttcttttc

     1861 accagtgaga cgggcaacag ctgattgccc ttcaccgcct ggccctgaga gagttgcagc

     1921 aagcggtcca cgctggtttg ccccagcagg cgaaaatcct gtttgatggt ggttaacggc

     1981 gggatataac atgagctgtc ttcggtatcg tcgtatccca ctaccgagat atccgcacca

     2041 acgcgcagcc cggactcggt aatggcgcgc attgcgccca gcgccatctg atcgttggca

     2101 accagcatcg cagtgggaac gatgccctca ttcagcattt gcatggtttg ttgaaaaccg

     2161 gacatggcac tccagtcgcc ttcccgttcc gctatcggct gaatttgatt gcgagtgaga

     2221 tatttatgcc agccagccag acgcagacgc gccgagacag aacttaatgg gcccgctaac

     2281 agcgcgattt gctggtgacc caatgcgacc agatgctcca cgcccagtcg cgtaccgtct

     2341 tcatgggaga aaataatact gttgatgggt gtctggtcag agacatcaag aaataacgcc

     2401 ggaacattag tgcaggcagc ttccacagca atggcatcct ggtcatccag cggatagtta

     2461 atgatcagcc cactgacgcg ttgcgcgaga agattgtgca ccgccgcttt acaggcttcg

     2521 acgccgcttc gttctaccat cgacaccacc acgctggcac ccagttgatc ggcgcgagat

     2581 ttaatcgccg cgacaatttg cgacggcgcg tgcagggcca gactggaggt ggcaacgcca

     2641 atcagcaacg actgtttgcc cgccagttgt tgtgccacgc ggttgggaat gtaattcagc

     2701 tccgccatcg ccgcttccac tttttcccgc gttttcgcag aaacgtggct ggcctggttc

     2761 accacgcggg aaacggtctg ataagagaca ccggcatact ctgcgacatc gtataacgtt

     2821 actggtttca cattcaccac cctgaattga ctctcttccg ggcgctatca tgccataccg

     2881 cgaaaggttt tgcgccattc gatggtgtcc gggatctcga cgctctccct tatgcgactc

     2941 ctgcattagg aagcagccca gtagtaggtt gaggccgttg agcaccgccg ccgcaaggaa

     3001 tggtgcatgc aaggagatgg cgcccaacag tcccccggcc acggggcctg ccaccatacc

     3061 cacgccgaaa caagcgctca tgagcccgaa gtggcgagcc cgatcttccc catcggtgat

     3121 gtcggcgata taggcgccag caaccgcacc tgtggcgccg gtgatgccgg ccacgatgcg

     3181 tccggcgtag aggatcgaga tctcgatccc gcgaaattaa tacgactcac tataggggaa

     3241 ttgtgagcgg ataacaattc ccctctagaa ataattttgt ttaactttaa gaaggagata

     3301 taccatgggc catcatcatc atcatcatca tcatcatcac agcagcggcc atatcgaagg

     3361 tcgtcatatg attttagatg tggattacat aactgaagaa ggaaaacctg ttattaggct