• 规格：10ul质粒
• 原核抗性：氨苄青霉素Amp
• 克隆菌株：大肠杆菌Stbl3
• 质粒简介：pET32a-MS2（V00642.1）是一个大肠杆菌噬菌体基因克隆质粒。

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LOCUS       Exported                7678 bp ds-DNA     circular SYN 23-NOV-2017

DEFINITION  synthetic circular DNA

FEATURES             Location/Qualifiers

     source          1..7678

                     /organism="synthetic DNA construct"

                     /mol_type="other DNA"

     rep_origin      12..467

                     /direction=RIGHT

                     /label=f1 ori

                     /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 

                     indicates direction of (+) strand synthesis"

     promoter        494..598

                     /gene="bla"

                     /label=AmpR promoter

     CDS             599..1459

                     /codon_start=1

                     /gene="bla"

                     /product="beta-lactamase"

                     /label=AmpR

                     /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and

                     related antibiotics"

                     /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI

                     ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS

                     PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW

                     EPELNEAIPNDERDTTMPAAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA

                     LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS

                     LIKHW"

     rep_origin      1630..2218

                     /direction=RIGHT

                     /label=ori

                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 

                     replication"

     misc_feature    2404..2546

                     /label=bom

                     /note="basis of mobility region from pBR322"

     CDS             complement(2648..2839)

                     /codon_start=1

                     /gene="rop"

                     /product="Rop protein, which maintains plasmids at low copy

                     number"

                     /label=rop

                     /translation="MTKQEKTALNMARFIRSQTLTLLEKLNELDADEQADICESLHDHA

                     DELYRSCLARFGDDGENL"

     CDS             complement(3648..4730)

                     /codon_start=1

                     /gene="lacI"

                     /product="lac repressor"

                     /label=lacI

                     /note="The lac repressor binds to the lac operator to 

                     inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be 

                     relieved by adding lactose or 

                     isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."

                     /translation="MKPVTLYDVAEYAGVSYQTVSRVVNQASHVSAKTREKVEAAMAEL

                     NYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKSRADQLGASVVVSMVERSGV

                     EACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNVPALFLDVSDQTPINSIIFSH

                     EDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGWHKYLTRNQIQPIAEREGDWSA

                     MSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITESGLRVGADISVVGYDDTEDSSC

                     YIPPLTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQLLPVSLVKRKTTLAPNTQTASPR

                     ALADSLMQLARQVSRLESGQ"

     promoter        complement(4731..4808)

                     /gene="lacI"

                     /label=lacI promoter

     primer_bind     5121..5140

                     /label=T7

     promoter        5121..5139

                     /label=T7 promoter

                     /note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"

     protein_bind    5140..5164

                     /label=lac operator

                     /bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"

                     /note="The lac repressor binds to the lac operator to 

                     inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be 

                     relieved by adding lactose or 

                     isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."

     RBS             5179..5201

                     /note="efficient ribosome binding site from bacteriophage 

                     T7 gene 10 (Olins and Rangwala, 1989)"

     CDS             5209..5535

                     /codon_start=1

                     /gene="trxA"

                     /product="E. coli thioredoxin"

                     /label=TrxA

                     /translation="MSDKIIHLTDDSFDTDVLKADGAILVDFWAEWCGPCKMIAPILDE

                     IADEYQGKLTVAKLNIDQNPGTAPKYGIRGIPTLLLFKNGEVAATKVGALSKGQLKEFL

                     DANLA"

     CDS             5557..5574

                     /codon_start=1

                     /product="6xHis affinity tag"

                     /label=6xHis

                     /translation="HHHHHH"

     CDS             5608..5652

                     /codon_start=1

                     /product="affinity and epitope tag derived from pancreatic 

                     ribonuclease A"

                     /label=S-Tag

                     /translation="KETAAAKFERQHMDS"

     misc_feature    5704..7500

                     /label=MS2

                     /note="phage MS2 genomeGenBank: V00642.1"

     primer_bind     complement(7592..7611)

                     /label=T7-ter

     terminator      7606..7653

                     /label=T7 terminator

                     /note="transcription terminator for bacteriophage T7 RNA 

                     polymerase"

ORIGIN

        1 tggcgaatgg gacgcgccct gtagcggcgc attaagcgcg gcgggtgtgg tggttacgcg

       61 cagcgtgacc gctacacttg ccagcgccct agcgcccgct cctttcgctt tcttcccttc

      121 ctttctcgcc acgttcgccg gctttccccg tcaagctcta aatcgggggc tccctttagg

      181 gttccgattt agtgctttac ggcacctcga ccccaaaaaa cttgattagg gtgatggttc

      241 acgtagtggg ccatcgccct gatagacggt ttttcgccct ttgacgttgg agtccacgtt

      301 ctttaatagt ggactcttgt tccaaactgg aacaacactc aaccctatct cggtctattc

      361 ttttgattta taagggattt tgccgatttc ggcctattgg ttaaaaaatg agctgattta

      421 acaaaaattt aacgcgaatt ttaacaaaat attaacgttt acaatttcag gtggcacttt

      481 tcggggaaat gtgcgcggaa cccctatttg tttatttttc taaatacatt caaatatgta

      541 tccgctcatg agacaataac cctgataaat gcttcaataa tattgaaaaa ggaagagtat

      601 gagtattcaa catttccgtg tcgcccttat tccctttttt gcggcatttt gccttcctgt

      661 ttttgctcac ccagaaacgc tggtgaaagt aaaagatgct gaagatcagt tgggtgcacg

      721 agtgggttac atcgaactgg atctcaacag cggtaagatc cttgagagtt ttcgccccga

      781 agaacgtttt ccaatgatga gcacttttaa agttctgcta tgtggcgcgg tattatcccg

      841 tattgacgcc gggcaagagc aactcggtcg ccgcatacac tattctcaga atgacttggt

      901 tgagtactca ccagtcacag aaaagcatct tacggatggc atgacagtaa gagaattatg

      961 cagtgctgcc ataaccatga gtgataacac tgcggccaac ttacttctga caacgatcgg

     1021 aggaccgaag gagctaaccg cttttttgca caacatgggg gatcatgtaa ctcgccttga

     1081 tcgttgggaa ccggagctga atgaagccat accaaacgac gagcgtgaca ccacgatgcc

     1141 tgcagcaatg gcaacaacgt tgcgcaaact attaactggc gaactactta ctctagcttc

     1201 ccggcaacaa ttaatagact ggatggaggc ggataaagtt gcaggaccac ttctgcgctc

     1261 ggcccttccg gctggctggt ttattgctga taaatctgga gccggtgagc gtgggtctcg

     1321 cggtatcatt gcagcactgg ggccagatgg taagccctcc cgtatcgtag ttatctacac

     1381 gacggggagt caggcaacta tggatgaacg aaatagacag atcgctgaga taggtgcctc

     1441 actgattaag cattggtaac tgtcagacca agtttactca tatatacttt agattgattt

     1501 aaaacttcat ttttaattta aaaggatcta ggtgaagatc ctttttgata atctcatgac

     1561 caaaatccct taacgtgagt tttcgttcca ctgagcgtca gaccccgtag aaaagatcaa

     1621 aggatcttct tgagatcctt tttttctgcg cgtaatctgc tgcttgcaaa caaaaaaacc

     1681 accgctacca gcggtggttt gtttgccgga tcaagagcta ccaactcttt ttccgaaggt

     1741 aactggcttc agcagagcgc agataccaaa tactgtcctt ctagtgtagc cgtagttagg

     1801 ccaccacttc aagaactctg tagcaccgcc tacatacctc gctctgctaa tcctgttacc

     1861 agtggctgct gccagtggcg ataagtcgtg tcttaccggg ttggactcaa gacgatagtt

     1921 accggataag gcgcagcggt cgggctgaac ggggggttcg tgcacacagc ccagcttgga

     1981 gcgaacgacc tacaccgaac tgagatacct acagcgtgag ctatgagaaa gcgccacgct

     2041 tcccgaaggg agaaaggcgg acaggtatcc ggtaagcggc agggtcggaa caggagagcg

     2101 cacgagggag cttccagggg gaaacgcctg gtatctttat agtcctgtcg ggtttcgcca

     2161 cctctgactt gagcgtcgat ttttgtgatg ctcgtcaggg gggcggagcc tatggaaaaa

     2221 cgccagcaac gcggcctttt tacggttcct ggccttttgc tggccttttg ctcacatgtt

     2281 ctttcctgcg ttatcccctg attctgtgga taaccgtatt accgcctttg agtgagctga

     2341 taccgctcgc cgcagccgaa cgaccgagcg cagcgagtca gtgagcgagg aagcggaaga

     2401 gcgcctgatg cggtattttc tccttacgca tctgtgcggt atttcacacc gcatatatgg

     2461 tgcactctca gtacaatctg ctctgatgcc gcatagttaa gccagtatac actccgctat

     2521 cgctacgtga ctgggtcatg gctgcgcccc gacacccgcc aacacccgct gacgcgccct

     2581 gacgggcttg tctgctcccg gcatccgctt acagacaagc tgtgaccgtc tccgggagct

     2641 gcatgtgtca gaggttttca ccgtcatcac cgaaacgcgc gaggcagctg cggtaaagct

     2701 catcagcgtg gtcgtgaagc gattcacaga tgtctgcctg ttcatccgcg tccagctcgt

     2761 tgagtttctc cagaagcgtt aatgtctggc ttctgataaa gcgggccatg ttaagggcgg<