• 规格：20μl质粒
• 启动子：Tac/lac promoter
• 复制子：ColE1 ori
• 质粒分类：大肠杆菌载体；pGEX系列表达质粒
• 质粒标签：N-GST，C-TagRFP
• 原核抗性：氨苄青霉素Amp
• 克隆菌株：大肠杆菌DH5α
• 表达宿主：大肠杆菌
• 诱导方式：IPTG或乳糖及其类似物
• 5测序引物：pGEX5: GGGCTGGCAAGCCACGTTTGGTG
• 3测序引物：pGEX3: CCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGG
• 备注：可用GST亲和柱纯化重组蛋白
• 质粒简介：             pGEX-TagRFP是一个大肠杆菌红色荧光蛋白表达质粒，由武汉淼灵生物科技有限公司构建并共享至淼灵质粒平台。
• 质粒图谱1： png/1-1G201141F4C7.png

质粒序列： 点击查看序列

LOCUS       Exported                5704 bp ds-DNA     circular SYN 01-DEC-2017

DEFINITION  synthetic circular DNA

FEATURES             Location/Qualifiers

     source          1..5704

                     /organism="synthetic DNA construct"

                     /mol_type="other DNA"

     promoter        183..211

                     /label=tac promoter

                     /note="strong E. coli promoter; hybrid between the trp and 

                     lac UV5 promoters"

     protein_bind    219..235

                     /label=lac operator

                     /bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"

                     /note="The lac repressor binds to the lac operator to 

                     inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be 

                     relieved by adding lactose or 

                     isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."

     CDS             258..911

                     /codon_start=1

                     /product="glutathione S-transferase from Schistosoma 

                     japonicum"

                     /label=GST

                     /translation="MSPILGYWKIKGLVQPTRLLLEYLEEKYEEHLYERDEGDKWRNKK

                     FELGLEFPNLPYYIDGDVKLTQSMAIIRYIADKHNMLGGCPKERAEISMLEGAVLDIRY

                     GVSRIAYSKDFETLKVDFLSKLPEMLKMFEDRLCHKTYLNGDHVTHPDFMLYDALDVVL

                     YMDPMCLDAFPKLVCFKKRIEAIPQIDKYLKSSKYIAWPLQGWQATFGGGDHPPK"

     CDS             918..935

                     /codon_start=1

                     /product="thrombin recognition and cleavage site"

                     /label=thrombin site

                     /translation="LVPRGS"

     CDS             969..1682

                     /codon_start=1

                     /product="monomeric derivative of red fluorescent protein 

                     from Entacmaea quadricolor (Merzlyak et al., 2007)"

                     /label=TagRFP

                     /note="mammalian codon-optimized"

                     /translation="MVSKGEELIKENMHMKLYMEGTVNNHHFKCTSEGEGKPYEGTQTM

                     RIKVVEGGPLPFAFDILATSFMYGSRTFINHTQGIPDFFKQSFPEGFTWERVTTYEDGG

                     VLTATQDTSLQDGCLIYNVKIRGVNFPSNGPVMQKKTLGWEANTEMLYPADGGLEGRSD

                     MALKLVGGGHLICNFKTTYRSKKPAKNLKMPGVYYVDHRLERIKEADKETYVEQHEVAV

                     ARYCDLPSKLGHKLN"

     promoter        2007..2111

                     /gene="bla"

                     /label=AmpR promoter

     CDS             2112..2972

                     /codon_start=1

                     /gene="bla"

                     /product="beta-lactamase"

                     /label=AmpR

                     /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and

                     related antibiotics"

                     /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI

                     ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRVDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS

                     PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW

                     EPELNEAIPNDERDTTMPAAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA

                     LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS

                     LIKHW"

     rep_origin      3143..3731

                     /direction=RIGHT

                     /label=ori

                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 

                     replication"

     promoter        3975..4052

                     /gene="lacI (mutant)"

                     /label=lacIq promoter

                     /note="In the lacIq allele, a single base change in the 

                     promoter boosts expression of the lacI gene about 10-fold."

     CDS             4053..5135

                     /codon_start=1

                     /gene="lacI"

                     /product="lac repressor"

                     /label=lacI

                     /note="The lac repressor binds to the lac operator to 

                     inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be 

                     relieved by adding lactose or 

                     isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."

                     /translation="MKPVTLYDVAEYAGVSYQTVSRVVNQASHVSAKTREKVEAAMAEL

                     NYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKSRADQLGASVVVSMVERSGV

                     EACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNVPALFLDVSDQTPINSIIFSH

                     EDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGWHKYLTRNQIQPIAEREGDWSA

                     MSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITESGLRVGADISVVGYDDTEDSSC

                     YIPPLTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQLLPVSLVKRKTTLAPNTQTASPR

                     ALADSLMQLARQVSRLESGQ"

     CDS             5258..5704

                     /codon_start=1

                     /gene="lacZ fragment"

                     /product="LacZ-alpha fragment of beta-galactosidase"

                     /label=lacZ-alpha

                     /translation="MTMITDSLAVVLQRRDWENPGVTQLNRLAAHPPFASWRNSEEART

                     DRPSQQLRSLNGEWRFAWFPAPEAVPESWLECDLPEADTVVVPSNWQMHGYDAPIYTNV

                     TYPITVNPPFVPTENPTGCYSLTFNVDESWLQEGQTRIIFDGVGI"

ORIGIN

        1 acgttatcga ctgcacggtg caccaatgct tctggcgtca ggcagccatc ggaagctgtg

       61 gtatggctgt gcaggtcgta aatcactgca taattcgtgt cgctcaaggc gcactcccgt

      121 tctggataat gttttttgcg ccgacatcat aacggttctg gcaaatattc tgaaatgagc

      181 tgttgacaat taatcatcgg ctcgtataat gtgtggaatt gtgagcggat aacaatttca

      241 cacaggaaac agtattcatg tcccctatac taggttattg gaaaattaag ggccttgtgc

      301 aacccactcg acttcttttg gaatatcttg aagaaaaata tgaagagcat ttgtatgagc

      361 gcgatgaagg tgataaatgg cgaaacaaaa agtttgaatt gggtttggag tttcccaatc

      421 ttccttatta tattgatggt gatgttaaat taacacagtc tatggccatc atacgttata

      481 tagctgacaa gcacaacatg ttgggtggtt gtccaaaaga gcgtgcagag atttcaatgc

      541 ttgaaggagc ggttttggat attagatacg gtgtttcgag aattgcatat agtaaagact

      601 ttgaaactct caaagttgat tttcttagca agctacctga aatgctgaaa atgttcgaag

      661 atcgtttatg tcataaaaca tatttaaatg gtgatcatgt aacccatcct gacttcatgt

      721 tgtatgacgc tcttgatgtt gttttataca tggacccaat gtgcctggat gcgttcccaa

      781 aattagtttg ttttaaaaaa cgtattgaag ctatcccaca aattgataag tacttgaaat

      841 ccagcaagta tatagcatgg cctttgcagg gctggcaagc cacgtttggt ggtggcgacc

      901 atcctccaaa atcggatctg gttccgcgtg gatccccggg aatttccggt ggtggtggtg

      961 gaattctaat ggtgtctaag ggcgaagagc tgattaagga gaacatgcac atgaagctgt

     1021 acatggaggg caccgtgaac aaccaccact tcaagtgcac atccgagggc gaaggcaagc

     1081 cctacgaggg cacccagacc atgagaatca aggtggtcga gggcggccct ctccccttcg

     1141 ccttcgacat cctggctacc agcttcatgt acggcagcag aaccttcatc aaccacaccc

     1201 agggcatccc cgacttcttt aagcagtcct tccctgaggg cttcacatgg gagagagtca

     1261 ccacatacga agacgggggc gtgctgaccg ctacccagga caccagcctc caggacggct

     1321 gcctcatcta caacgtcaag atcagagggg tgaacttccc atccaacggc cctgtgatgc

     1381 agaagaaaac actcggctgg gaggccaaca ccgagatgct gtaccccgct gacggcggcc

     1441 tggaaggcag aagcgacatg gccctgaagc tcgtgggcgg gggccacctg atctgcaact

     1501 tcaagaccac atacagatcc aagaaacccg ctaagaacct caagatgccc ggcgtctact

     1561 atgtggacca cagactggaa agaatcaagg aggccgacaa agagacctac gtcgagcagc

     1621 acgaggtggc tgtggccaga tactgcgacc tccctagcaa actggggcac aaacttaatt

     1681 gactcgagct caagcttatt catcgtgact gactgacgat ctgcctcgcg cgtttcggtg

     1741 atgacggtga aaacctctga cacatgcagc tcccggagac ggtcacagct tgtctgtaag

     1801 cggatgccgg gagcagacaa gcccgtcagg gcgcgtcagc gggtgttggc gggtgtcggg

     1861 gcgcagccat gacccagtca cgtagcgata gcggagtgta taattcttga agacgaaagg

     1921 gcctcgtgat acgcctattt ttataggtta atgtcatgat aataatggtt tcttagacgt

     1981 caggtggcac ttttcgggga aatgtgcgcg gaacccctat ttgtttattt ttctaaatac

     2041 attcaaatat gtatccgctc atgagacaat aaccctgata aatgcttcaa taatattgaa

     2101 aaaggaagag tatgagtatt caacatttcc gtgtcgccct tattcccttt tttgcggcat

     2161 tttgccttcc tgtttttgct cacccagaaa cgctggtgaa agtaaaagat gctgaagatc

     2221 agttgggtgc acgagtgggt tacatcgaac tggatctcaa cagcggtaag atccttgaga

     2281 gttttcgccc cgaagaacgt tttccaatga tgagcacttt taaagttctg ctatgtggcg

     2341 cggtattatc ccgtgttgac gccgggcaag agcaactcgg tcgccgcata cactattctc

     2401 agaatgactt ggttgagtac tcaccagtca cagaaaagca tcttacggat ggcatgacag

     2461 taagagaatt atgcagtgct gccataacca tgagtgataa cactgcggcc aacttacttc

     2521 tgacaacgat cggaggaccg aaggagctaa ccgctttttt gcacaacatg ggggatcatg

     2581 taactcgcct tgatcgttgg gaaccggagc tgaatgaagc cataccaaac gacgagcgtg

     2641 acaccacgat gcctgcagca atggcaacaa cgttgcgcaa actattaact ggcgaactac

     2701 ttactctagc ttcccggcaa caattaatag actggatgga ggcggataaa gttgcaggac

     2761 cacttctgcg ctcggccctt ccggctggct ggtttattgc tgataaatct ggagccggtg

     2821 agcgtgggtc tcgcggtatc attgcagcac tggggccaga tggtaagccc tcccgtatcg

     2881 tagttatcta cacgacgggg agtcaggcaa ctatggatga acgaaataga cagatcgctg

     2941 agataggtgc ctcactgatt aagcattggt aactgtcaga ccaagtttac tcatatatac

     3001 tttagattga tttaaaactt catttttaat ttaaaaggat ctaggtgaag atcctttttg

     3061 ataatctcat gaccaaaatc ccttaacgtg agttttcgtt ccactgagcg tcagaccccg

     3121 tagaaaagat caaaggatct tcttgagatc ctttttttct gcgcgtaatc tgctgcttgc

     3181 aaacaaaaaa accaccgcta ccagcggtgg tttgtttgcc ggatcaagag ctaccaactc

     3241 tttttccgaa ggtaactggc ttcagcagag cgcagatacc aaatactgtc cttctagtgt

     3301 agccgtagtt aggccaccac ttcaagaact ctgtagcacc gcctacatac ctcgctctgc

     3361 taatcctgtt accagtggct gctgccagtg gcgataagtc gtgtcttacc gggttggact

     3421 caagacgata gttaccggat aa