• 规格：20μl质粒
• 原核抗性：氨苄青霉素Amo
• 筛选标记：博来霉素Zeo
• 克隆菌株：大肠杆菌Stbl3
• 表达宿主：哺乳细胞
• 质粒简介：            Ef1a_Large T-antigen_Ires_Puro是一个哺乳细胞慢病毒大T抗原表达质粒。
• 质粒图谱1： png/1-1G21416245T58.png

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LOCUS       Exported               11672 bp ds-DNA     circular SYN 14-DEC-2017

DEFINITION  synthetic circular DNA

FEATURES             Location/Qualifiers

     source          1..11672

                     /organism="synthetic DNA construct"

                     /mol_type="other DNA"

     CDS             1..2127

                     /codon_start=1

                     /product="large T antigen from SV40 (simian virus 40)"

                     /label=large T antigen

                     /translation="MDKVLNREESLQLMDLLGLERSAWGNIPLMRKAYLKKCKEFHPDK

                     GGDEEKMKKMNTLYKKMEDGVKYAHQPDFGGFWDATEIPTYGTDEWEQWWNAFNEENLF

                     CSEEMPSSDDEATADSQHSTPPKKKRKVEDPKDFPSELLSFLSHAVFSNRTLACFAIYT

                     TKEKAALLYKKIMEKYSVTFISRHNSYNHNILFFLTPHRHRVSAINNYAQKLCTFSFLI

                     CKGVNKEYLMYSALTRDPFSVIEESLPGGLKEHDFNPEEAEETKQVSWKLVTEYAMETK

                     CDDVLLLLGMYLEFQYSFEMCLKCIKKEQPSHYKYHEKHYANAAIFADSKNQKTICQQA

                     VDTVLAKKRVDSLQLTREQMLTNRFNDLLDRMDIMFGSTGSADIEEWMAGVAWLHCLLP

                     KMDSVVYDFLKCMVYNIPKKRYWLFKGPIDSGKTTLAAALLELCGGKALNVNLPLDRLN

                     FELGVAIDQFLVVFEDVKGTGGESRDLPSGQGINNLDNLRDYLDGSVKVNLEKKHLNKR

                     TQIFPPGIVTMNEYSVPKTLQARFVKQIDFRPKDYLKHCLERSEFLLEKRIIQSGIALL

                     LMLIWYRPVAEFAQSIQSRIVEWKERLDKEFSLSVYQKMKFNVAMGIGVLDWLRNSDDD

                     DEDSQENADKNEDGGEKNMEDSGHETGIDSQSQGSFQAPQSSQSVHDHNQPYHICRGFT

                     CFKKPPTPPPEPET"

     misc_feature    2159..2745

                     /label=IRES2

                     /note="internal ribosome entry site (IRES) of the 

                     encephalomyocarditis virus (EMCV)"

     CDS             2746..3345

                     /codon_start=1

                     /gene="pac from Streptomyces alboniger"

                     /product="puromycin N-acetyltransferase"

                     /label=PuroR

                     /note="confers resistance to puromycin"

                     /translation="MTEYKPTVRLATRDDVPRAVRTLAAAFADYPATRHTVDPDRHIER

                     VTELQELFLTRVGLDIGKVWVADDGAAVAVWTTPESVEAGAVFAEIGPRMAELSGSRLA

                     AQQQMEGLLAPHRPKEPAWFLATVGVSPDHQGKGLGSAVVLPGVEAAERAGVPAFLETS

                     APRNLPFYERLGFTVTADVEVPEGPRTWCMTRKPGA"

     protein_bind    3459..3492

                     /label=loxP

                     /bound_moiety="Cre recombinase"

                     /note="Cre-mediated recombination occurs in the 8-bp core 

                     sequence (GCATACAT)."

     LTR             3517..3697

                     /label=5' LTR (truncated)

                     /note="truncated 5' long terminal repeat (LTR) from HIV-1"

     polyA_signal    3729..3953

                     /label=bGH poly(A) signal

                     /note="bovine growth hormone polyadenylation signal"

     rep_origin      3999..4427

                     /direction=RIGHT

                     /label=f1 ori

                     /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 

                     indicates direction of (+) strand synthesis"

     promoter        4441..4770

                     /label=SV40 promoter

                     /note="SV40 enhancer and early promoter"

     rep_origin      4621..4756

                     /label=SV40 ori

                     /note="SV40 origin of replication"

     promoter        4818..4865

                     /label=EM7 promoter

                     /note="synthetic bacterial promoter "

     CDS             4884..5258

                     /codon_start=1

                     /gene="Sh ble from Streptoalloteichus hindustanus"

                     /product="antibiotic-binding protein"

                     /label=Zeo

                     /note="confers resistance to bleomycin, phleomycin, and 

                     Zeocin(TM)"

                     /translation="MAKLTSAVPVLTARDVAGAVEFWTDRLGFSRDFVEDDFAGVVRDD

                     VTLFISAVQDQVVPDNTLAWVWVRGLDELYAEWSEVVSTNFRDASGPAMTEIGEQPWGR

                     EFALRDPAGNCVHFVAEEQD"

     polyA_signal    5388..5509

                     /label=SV40 poly(A) signal

                     /note="SV40 polyadenylation signal"

     rep_origin      complement(5960..6548)

                     /direction=LEFT

                     /label=ori

                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 

                     replication"

     CDS             complement(6719..7579)

                     /codon_start=1

                     /gene="bla"

                     /product="beta-lactamase"

                     /label=AmpR

                     /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and

                     related antibiotics"

                     /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI

                     ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS

                     PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW

                     EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA

                     LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS

                     LIKHW"

     promoter        complement(7580..7684)

                     /gene="bla"

                     /label=AmpR promoter

     enhancer        7950..8329

                     /label=CMV enhancer

                     /note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"

     promoter        8331..8529

                     /label=CMV promoter

                     /note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early 

                     promoter"

     LTR             8547..8727

                     /label=5' LTR (truncated)

                     /note="truncated 5' long terminal repeat (LTR) from HIV-1"

     misc_feature    8774..8899

                     /label=HIV-1 Psi

                     /note="packaging signal of human immunodeficiency virus 

                     type 1"

     misc_feature    9392..9625

                     /label=RRE

                     /note="The Rev response element (RRE) of HIV-1 allows for 

                     Rev-dependent mRNA export from the nucleus to the 

                     cytoplasm."

     misc_feature    10152..10269

                     /label=cPPT/CTS

                     /note="central polypurine tract and central termination 

                     sequence of HIV-1"

     promoter        10405..11583

                     /label=EF-1-alpha promoter

                     /note="strong constitutive promoter for human elongation 

                     factor EF-1-alpha"

     promoter        11600..11618

                     /label=T7 promoter

                     /note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"

ORIGIN

        1 atggataaag ttttaaacag agaggaatct ttgcagctaa tggaccttct aggtcttgaa

       61 aggagtgcct gggggaatat tcctctgatg agaaaggcat atttaaaaaa atgcaaggag

      121 tttcatcctg ataaaggagg agatgaagaa aaaatgaaga aaatgaatac tctgtacaag

      181 aaaatggaag atggagtaaa atatgctcat caacctgact ttggaggctt ctgggatgca

      241 actgagattc caacctatgg aactgatgaa tgggagcagt ggtggaatgc ctttaatgag

      301 gaaaacctgt tttgctcaga agaaatgcca tctagtgatg atgaggctac tgctgactct

      361 caacattcta ctcctccaaa aaagaagaga aaggtagaag accccaagga ctttccttca

      421 gaattgctaa gttttttgag tcatgctgtg tttagtaata gaactcttgc ttgctttgct

      481 atttacacca caaaggaaaa agctgcactg ctatacaaga aaattatgga aaaatattct

      541 gtaaccttta taagtaggca taacagttat aatcataaca tactgttttt tcttactcca

      601 cacaggcata gagtgtctgc tattaataac tatgctcaaa aattgtgtac ctttagcttt

      661 ttaatttgta aaggggttaa taaggaatat ttgatgtata gtgccttgac tagagatcca

      721 ttttctgtta ttgaggaaag tttgccaggt gggttaaagg agcatgattt taatccagaa

      781 gaagcagagg aaactaaaca agtgtcctgg aagcttgtaa cagagtatgc aatggaaaca

      841 aaatgtgatg atgtgttgtt attgcttggg atgtacttgg aatttcagta cagttttgaa

      901 atgtgtttaa aatgtattaa aaaagaacag cccagccact ataagtacca tgaaaagcat

      961 tatgcaaatg ctgctatatt tgctgacagc aaaaaccaaa aaaccatatg ccaacaggct

     1021 gttgatactg ttttagctaa aaagcgggtt gatagcctac aattaactag agaacaaatg

     1081 ttaacaaaca gatttaatga tcttttggat aggatggata taatgtttgg ttctacaggc

     1141 tctgctgaca tagaagaatg gatggctgga gttgcttggc tacactgttt gttgcccaaa

     1201 atggattcag tggtgtatga ctttttaaaa tgcatggtgt acaacattcc taaaaaaaga

     1261 tactggctgt ttaaaggacc aattgatagt ggtaaaacta cattagcagc tgctttgctt

     1321 gaattatgtg gggggaaagc tttaaatgtt aatttgccct tggacaggct gaactttgag