• 规格：20μl质粒
• 原核抗性：氨苄青霉素Amp
• 筛选标记：遗传霉素G418
• 克隆菌株：大肠杆菌DH5α
• 质粒简介：          pECMV-3×FLAG-T7 RNA polymerase是一个哺乳细胞T7 RNA聚合酶表达质粒。
• 质粒图谱1： png/1-1G219154141556.png

质粒序列： 点击查看序列

LOCUS       Exported                8134 bp ds-DNA     circular SYN 19-DEC-2017

DEFINITION  synthetic circular DNA

FEATURES             Location/Qualifiers

     source          1..8134

                     /organism="synthetic DNA construct"

                     /mol_type="other DNA"

     enhancer        235..614

                     /label=CMV enhancer

                     /note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"

     promoter        615..818

                     /label=CMV promoter

                     /note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early 

                     promoter"

     promoter        863..881

                     /label=T7 promoter

                     /note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"

     regulatory      913..922

                     /regulatory_class="other"

                     /note="vertebrate consensus sequence for strong initiation 

                     of translation (Kozak, 1987)"

     CDS             922..987

                     /codon_start=1

                     /product="three tandem FLAG(R) epitope tags, followed by an

                     enterokinase cleavage site"

                     /label=3xFLAG

                     /translation="DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK"

     CDS             1033..3690

                     /codon_start=1

                     /label=T7 RNA polymerase

                     /translation="MNTINIAKNDFSDIELAAIPFNTLADHYGERLAREQLALEHESYE

                     MGEARFRKMFERQLKAGEVADNAAAKPLITTLLPKMIARINDWFEEVKAKRGKRPTAFQ

                     FLQEIKPEAVAYITIKTTLACLTSADNTTVQAVASAIGRAIEDEARFGRIRDLEAKHFK

                     KNVEEQLNKRVGHVYKKAFMQVVEADMLSKGLLGGEAWSSWHKEDSIHVGVRCIEMLIE

                     STGMVSLHRQNAGVVGQDSETIELAPEYAEAIATRAGALAGISPMFQPCVVPPKPWTGI

                     TGGGYWANGRRPLALVRTHSKKALMRYEDVYMPEVYKAINIAQNTAWKINKKVLAVANV

                     ITKWKHCPVEDIPAIEREELPMKPEDIDMNPEALTAWKRAAAAVYRKDKARKSRRISLE

                     FMLEQANKFANHKAIWFPYNMDWRGRVYAVSMFNPQGNDMTKGLLTLAKGKPIGKEGYY

                     WLKIHGANCAGVDKVPFPERIKFIEENHENIMACAKSPLENTWWAEQDSPFCFLAFCFE

                     YAGVQHHGLSYNCSLPLAFDGSCSGIQHFSAMLRDEVGGRAVNLLPSETVQDIYGIVAK

                     KVNEILQADAINGTDNEVVTVTDENTGEISEKVKLGTKALAGQWLAYGVTRSVTKRSVM

                     TLAYGSKEFGFRQQVLEDTIQPAIDSGKGLMFTQPNQAAGYMAKLIWESVSVTVVAAVE

                     AMNWLKSAAKLLAAEVKDKKTGEILRKRCAVHWVTPDGFPVWQEYKKPIQTRLNLMFLG

                     QFRLQPTINTNKDSEIDAHKQESGIAPNFVHSQDGSHLRKTVVWAHEKYGIESFALIHD

                     SFGTIPADAANLFKAVRETMVDTYESCDVLADFYDQFADQLHESQLDKMPALPAKGNLN

                     LRDILESDFAFAFA"

     polyA_signal    3734..3958

                     /label=bGH poly(A) signal

                     /note="bovine growth hormone polyadenylation signal"

     rep_origin      4004..4432

                     /direction=RIGHT

                     /label=f1 ori

                     /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 

                     indicates direction of (+) strand synthesis"

     promoter        4446..4775

                     /label=SV40 promoter

                     /note="SV40 enhancer and early promoter"

     rep_origin      4626..4761

                     /label=SV40 ori

                     /note="SV40 origin of replication"

     CDS             4842..5636

                     /codon_start=1

                     /gene="aph(3')-II (or nptII)"

                     /product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"

                     /label=Neo

                     /note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418 

                     (Geneticin(R))"

                     /translation="MIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGRP

                     VLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLLS

                     SHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPATCPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEHQ

                     GLAPAELFARLKARMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA

                     LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"

     polyA_signal    5810..5931

                     /label=SV40 poly(A) signal

                     /note="SV40 polyadenylation signal"

     rep_origin      complement(6382..6967)

                     /direction=LEFT

                     /label=ori

                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 

                     replication"

     CDS             complement(7138..7998)

                     /codon_start=1

                     /gene="bla"

                     /product="beta-lactamase"

                     /label=Amp

                     /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and

                     related antibiotics"

                     /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI

                     ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS

                     PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW

                     EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA

                     LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS

                     LIKHW"

     promoter        complement(7999..8103)

                     /gene="bla"

                     /label=AmpR promoter

ORIGIN

        1 gacggatcgg gagatctccc gatcccctat ggtgcactct cagtacaatc tgctctgatg

       61 ccgcatagtt aagccagtat ctgctccctg cttgtgtgtt ggaggtcgct gagtagtgcg

      121 cgagcaaaat ttaagctaca acaaggcaag gcttgaccga caattgcatg aagaatctgc

      181 ttagggttag gcgttttgcg ctgcttcgcg atgtacgggc cagatatacg cgttgacatt

      241 gattattgac tagttattaa tagtaatcaa ttacggggtc attagttcat agcccatata

      301 tggagttccg cgttacataa cttacggtaa atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc

      361 cccgcccatt gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc

      421 attgacgtca atgggtggag tatttacggt aaactgccca cttggcagta catcaagtgt

      481 atcatatgcc aagtacgccc cctattgacg tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt

      541 atgcccagta catgacctta tgggactttc ctacttggca gtacatctac gtattagtca

      601 tcgctattac catggtgatg cggttttggc agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg

      661 actcacgggg atttccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc

      721 aaaatcaacg ggactttcca aaatgtcgta acaactccgc cccattgacg caaatgggcg

      781 gtaggcgtgt acggtgggag gtctatataa gcagagctct ctggctaact agagaaccca

      841 ctgcttactg gcttatcgaa attaatacga ctcactatag ggagacccaa gctggctagc

      901 gtttaaactt aagccaccat ggactacaaa gaccatgacg gtgattataa agatcatgac

      961 atcgactaca aggatgacga tgacaagctt ggtaccgagc tcggatccac tagtccagtg

     1021 tggtggaatt ctatgaacac gattaacatc gctaagaacg acttctctga catcgaactg

     1081 gctgctatcc cgttcaacac tctggctgac cattacggtg agcgtttagc tcgcgaacag

     1141 ttggcccttg agcatgagtc ttacgagatg ggtgaagcac gcttccgcaa gatgtttgag

     1201 cgtcaactta aagctggtga ggttgcggat aacgctgccg ccaagcctct catcactacc

     1261 ctactcccta agatgattgc acgcatcaac gactggtttg aggaagtgaa agctaagcgc

     1321 ggcaagcgcc cgacagcctt ccagttcctg caagaaatca agccggaagc cgtagcgtac

     1381 atcaccatta agaccactct ggcttgccta accagtgctg acaatacaac cgttcaggct

     1441 gtagcaagcg caatcggtcg ggccattgag gacgaggctc gcttcggtcg tatccgtgac

     1501 cttgaagcta agcacttcaa gaaaaacgtt gaggaacaac tcaacaagcg cgtagggcac

     1561 gtctacaaga aagcatttat gcaagttgtc gaggctgaca tgctctctaa gggtctactc

     1621 ggtggcgagg cgtggtcttc gtggcataag gaagactcta ttcatgtagg agtacgctgc

     1681 atcgagatgc tcattgagtc aaccggaatg gttagcttac accgccaaaa tgctggcgta

     1741 gtaggtcaag actctgagac tatcgaactc gcacctgaat acgctgaggc tatcgcaacc

     1801 cgtgcaggtg cgctggctgg catctctccg atgttccaac cttgcgtagt tcctcctaag

     1861 ccgtggactg gcattactgg tggtggctat tgggctaacg gtcgtcgtcc tctggcgctg

     1921 gtgcgtactc acagtaagaa agcactgatg cgctacgaag acgtttacat gcctgaggtg

     1981 tacaaagcga ttaacattgc gcaaaacacc gcatggaaaa tcaacaagaa agtcctagcg

     2041 gtcgccaacg taatcaccaa gtggaagcat tgtccggtcg aggacatccc tgcgattgag

     2101 cgtgaagaac tcccgatgaa accggaagac atcgacatga atcctgaggc tctcaccgcg

     2161 tggaaacgtg ctgccgctgc tgtgtaccgc aaggacaagg ctcgcaagtc tcgccgtatc

     2221 agccttgagt tcatgcttga gcaagccaat aagtttgcta accataaggc catctggttc

     2281 ccttacaaca tggactggcg cggtcgtgtt tacgctgtgt caatgttcaa cccgcaaggt

     2341 aacgatatga ccaaaggact gcttacgctg gcgaaaggta aaccaatcgg taaggaaggt

     2401 tactactggc tgaaaatcca cggtgcaaac tgtgcgggtg tcgataaggt tccgttccct

     2461 gagcgcatca agttcattga ggaaaaccac gagaacatca tggcttgcgc taagtctcca

     2521 ctggagaaca cttggtgggc tgagcaagat tctccgttct gcttccttgc gttctgcttt

     2581 gagtacgctg gggtacagca ccacggcctg agctataact gctcccttcc gctggcgttt

     2641 gacgggtctt gctctggcat ccagcacttc tccgcgatgc tccgagatga ggtaggtggt

     2701 cgcgcggtta acttgcttcc tagtgaaacc gttcaggaca tctacgggat tgttgctaag

     2761 aaagtcaacg agattctaca agcagacgca atcaatggga ccgataacga agtagttacc

     2821 gtgaccgatg agaacactgg tgaaatctct gagaaagtca agctgggcac taaggcactg

     2881 gctggtcaat ggctggctta cggtgttact cgcagtgtga ctaagcgttc agtcatgacg

     2941 ctggcttacg ggtccaaaga gttcggcttc cgtcaacaag tgctggaaga taccattcag

     3001 ccagctattg attccggcaa gggtctgatg ttcactcagc cgaatcaggc tgctggatac

     3061 atggctaagc tgatttggga atctgtgagc gtgacggtgg tagctgcggt tgaagcaatg

     3121 aactggctta agtctgctgc taagctgctg gctgctgagg tcaaagataa gaagactgga

     3181 gagattcttc gcaagcgttg cgctgtgcat tgggtaactc ctgatggttt ccctgtgtgg

     3241 caggaataca agaagcctat tcagacgcgc ttgaacctga tgttcctcgg tcagttccgc