• 规格：20μl质粒
• 启动子：CMV promoter
• 复制子：ori，F1 ori，SV40 ori
• 终止子：bGH poly(A) signal
• 质粒分类：基因文库质粒；其它基因质粒；其它种源质粒
• 质粒大小：7754bp
• 原核抗性：氨苄青霉素Amp（100μg/ml）
• 筛选标记：新霉素Neo/G418
• 克隆菌株：DH10B等大肠杆菌
• 表达宿主：293T哺乳细胞
• 诱导方式：无需诱导
• 质粒简介：                pCDNA3-4mtD3cpv质粒的参考文献：Ca2+ indicators based on computationally redesigned calmodulin-peptide pairs. 
  
  
• 质粒图谱1： png/1-1FQ5143J4X8.png

质粒序列： 点击查看序列

LOCUS       Exported                7754 bp ds-DNA     circular SYN 15-AUG-2017

DEFINITION  synthetic circular DNA

FEATURES             Location/Qualifiers

     source          1..7754

                     /organism="synthetic DNA construct"

                     /mol_type="other DNA"

     CDS             complement(83..943)

                     /codon_start=1

                     /gene="bla"

                     /product="beta-lactamase"

                     /label=AmpR

                     /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and

                     related antibiotics"

                     /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI

                     ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS

                     PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW

                     EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA

                     LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS

                     LIKHW"

     promoter        complement(944..1048)

                     /gene="bla"

                     /label=AmpR promoter

     enhancer        1314..1693

                     /label=CMV enhancer

                     /note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"

     promoter        1694..1897

                     /label=CMV promoter

                     /note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early 

                     promoter"

     promoter        1942..1960

                     /label=T7 promoter

                     /note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"

     misc_feature    1974..2060

                     /label=COX8a

                     /note="human COX subunit 8a"

     misc_feature    2069..4325

                     /label=4mtD3cpv

                     /note="4mtD3cpv second generation cameleon (calcium sensor)

                     targeted to mitochondria"

     CDS             3804..4322

                     /codon_start=1

                     /product="N-terminal fragment of mVenus for use in 

                     bimolecular fluorescence complementation (BiFC) (Kodama and

                     Hu, 2010)"

                     /label=VN173

                     /translation="MVSKGEELFTGVVPILVELDGDVNGHKFSVSGEGEGDATYGKLTL

                     KLICTTGKLPVPWPTLVTTLGYGLQCFARYPDHMKQHDFFKSAMPEGYVQERTIFFKDD

                     GNYKTRAEVKFEGDTLVNRIELKGIDFKEDGNILGHKLEYNYNSHNVYITADKQKNGIK

                     ANFKIRHNIE"

     promoter        complement(4386..4404)

                     /label=SP6 promoter

                     /note="promoter for bacteriophage SP6 RNA polymerase"

     polyA_signal    4430..4654

                     /label=bGH poly(A) signal

                     /note="bovine growth hormone polyadenylation signal"

     rep_origin      4700..5128

                     /direction=RIGHT

                     /label=f1 ori

                     /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 

                     indicates direction of (+) strand synthesis"

     promoter        5142..5471

                     /label=SV40 promoter

                     /note="SV40 enhancer and early promoter"

     rep_origin      5322..5457

                     /label=SV40 ori

                     /note="SV40 origin of replication"

     CDS             5538..6332

                     /codon_start=1

                     /gene="aph(3')-II (or nptII)"

                     /product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"

                     /label=NeoR/KanR

                     /note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418 

                     (Geneticin(R))"

                     /translation="MIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGRP

                     VLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLLS

                     SHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPATCPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEHQ

                     GLAPAELFARLKARMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA

                     LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"

     polyA_signal    6506..6627

                     /label=SV40 poly(A) signal

                     /note="SV40 polyadenylation signal"

     rep_origin      complement(7078..7666)

                     /direction=LEFT

                     /label=ori

                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 

                     replication"

ORIGIN

        1 ggatcttcac ctagatcctt ttaaattaaa aatgaagttt taaatcaatc taaagtatat

       61 atgagtaaac ttggtctgac agttaccaat gcttaatcag tgaggcacct atctcagcga

      121 tctgtctatt tcgttcatcc atagttgcct gactccccgt cgtgtagata actacgatac

      181 gggagggctt accatctggc cccagtgctg caatgatacc gcgagaccca cgctcaccgg

      241 ctccagattt atcagcaata aaccagccag ccggaagggc cgagcgcaga agtggtcctg

      301 caactttatc cgcctccatc cagtctatta attgttgccg ggaagctaga gtaagtagtt

      361 cgccagttaa tagtttgcgc aacgttgttg ccattgctac aggcatcgtg gtgtcacgct

      421 cgtcgtttgg tatggcttca ttcagctccg gttcccaacg atcaaggcga gttacatgat

      481 cccccatgtt gtgcaaaaaa gcggttagct ccttcggtcc tccgatcgtt gtcagaagta

      541 agttggccgc agtgttatca ctcatggtta tggcagcact gcataattct cttactgtca

      601 tgccatccgt aagatgcttt tctgtgactg gtgagtactc aaccaagtca ttctgagaat

      661 agtgtatgcg gcgaccgagt tgctcttgcc cggcgtcaat acgggataat accgcgccac

      721 atagcagaac tttaaaagtg ctcatcattg gaaaacgttc ttcggggcga aaactctcaa

      781 ggatcttacc gctgttgaga tccagttcga tgtaacccac tcgtgcaccc aactgatctt

      841 cagcatcttt tactttcacc agcgtttctg ggtgagcaaa aacaggaagg caaaatgccg

      901 caaaaaaggg aataagggcg acacggaaat gttgaatact catactcttc ctttttcaat

      961 attattgaag catttatcag ggttattgtc tcatgagcgg atacatattt gaatgtattt

     1021 agaaaaataa acaaataggg gttccgcgca catttccccg aaaagtgcca cctgacgtcg

     1081 acggatcggg agatctcccg atcccctatg gtgcactctc agtacaatct gctctgatgc

     1141 cgcatagtta agccagtatc tgctccctgc ttgtgtgttg gaggtcgctg agtagtgcgc

     1201 gagcaaaatt taagctacaa caaggcaagg cttgaccgac aattgcatga agaatctgct

     1261 tagggttagg cgttttgcgc tgcttcgcga tgtacgggcc agatatacgc gttgacattg

     1321 attattgact agttattaat agtaatcaat tacggggtca ttagttcata gcccatatat

     1381 ggagttccgc gttacataac ttacggtaaa tggcccgcct ggctgaccgc ccaacgaccc

     1441 ccgcccattg acgtcaataa tgacgtatgt tcccatagta acgccaatag ggactttcca

     1501 ttgacgtcaa tgggtggagt atttacggta aactgcccac ttggcagtac atcaagtgta

     1561 tcatatgcca agtacgcccc ctattgacgt caatgacggt aaatggcccg cctggcatta

     1621 tgcccagtac atgaccttat gggactttcc tacttggcag tacatctacg tattagtcat

     1681 cgctattacc atggtgatgc ggttttggca gtacatcaat gggcgtggat agcggtttga

     1741 ctcacgggga tttccaagtc tccaccccat tgacgtcaat gggagtttgt tttggcacca

     1801 aaatcaacgg gactttccaa aatgtcgtaa caactccgcc ccattgacgc aaatgggcgg

     1861 taggcgtgta cggtgggagg tctatataag cagagctctc tggctaacta gagaacccac

     1921 tgcttactgg cttatcgaaa ttaatacgac tcactatagg gagacccaag cttatgtccg

     1981 tcctgacgcc gctgctgctg cggggcttga caggctcggc ccggcggctc ccagtgccgc

     2041 gcgccaagat ccattcgttg ggggatccca tgtccgtcct gacgccgctg ctgctgcggg

     2101 gcttgacagg ctcggcccgg cggctcccag tgccgcgcgc caagatccat tcgttgggga

     2161 agcttatgtc cgtcctgacg ccgctgctgc tgcggggctt gacaggctcg gcccggcggc

     2221 tcccagtgcc gcgcgccaag atccattcgt tgggggatcc catgtccgtc ctgacgccgc

     2281 tgctgctgcg gggcttgaca ggctcggccc ggcggctccc agtgccgcgc gccaagatcc

     2341 attcgttggg gaagcttgcc accatggtga gcaagggcga ggagctgttc accggggtgg

     2401 tgcccatcct ggtcgagctg gacggcgacg taaacggcca caggttcagc gtgtccggcg

     2461 agggcgaggg cgatgccacc tacggcaagc tgaccctgaa gttcatctgc accaccggca

     2521 agctgcccgt gccctggccc accctcgtga ccaccctgac ctggggcgtg cagtgcttca

     2581 gccgctaccc cgaccacatg aagcagcacg acttcttcaa gtccgccatg cccgaaggct

     2641 acgtccagga gcgtaccatc ttcttcaagg acgacggcaa ctacaagacc cgcgccgagg

     2701 tgaagttcga gggcgacacc ctggtgaacc gcatcgagct gaagggcatc gacttcaagg

     2761 aggacggcaa catcctgggg cacaagctgg agtacaacta catcagccac aacgtctata

     2821 tcaccgccga caagcagaag aacggcatca aggcccactt caagatccgc cacaacatcg

     2881 aggacggcag cgtgcagctc gccgaccact accagcagaa cacccccatc ggcgacggcc

     2941 ccgtgctgct gcccgacaac cactacctga gcacccagtc cgccctgagc aaagacccca

     3001 acgagaagcg cgatcacatg gtcctgctgg agttcgtgac cgccgcccgc atgcatgacc

     3061 aactgacaga agagcagatt gcagagttca aagaagcctt ctcattattg gacaaggatg

     3121 gggacggcac catcaccaca aaggaacttg gcaccgctct gaggtcgctt ggacaaaacc

     3181 caacggaagc agaattgcag gatatgatca atgaagtcga tgctgatggc aatggaacga

     3241 tttactttcc tgaatttctt actatgatgg ctagaaaaat gaaggacaca gacagcgaag

     3301 aggaaatccg agaagcattc cgtgtttttg acaaggatgg gaacggctac atcagcgctg

     3361 ctgaattacg tcacgtcatg acaaacctcg gggagaagtt aacagatgaa gaagttgatg

     3421 aaatgataag ggaagcagat atcgatggtg atggccaagt aaactatgaa gagtttgtac

     3481 aaatgatgac agcaaagggg gggaagaggc gctggcagaa aacaggccat gctgtccgag

     3541 cattcggaag actgaagaag atctccagct ccggggcact ggagctcatg gacggcggcg

     3601 tgcagctcgc cgaccactac cagcagaaca cccccatcgg cgacggcccc gtgctgctgc

     3661 ccgacaacca ctacctgagc taccagtccg ccctgagcaa agaccccaac gagaagcgcg

     3721 atcacatggt cctgctggag ttcgtgaccg ccgccgggat cactctcggc atggacgagc

     3781 tgtacaaggg tggcagcggt ggcatggtga gcaagggcga ggagctgttc accggggtgg

     3841 tgcccatcct ggtcgagctg gacggcgacg taaacggcca caagttcagc gtgtccggcg

     3901 agggcgaggg cgatgccacc tacggcaagc tgaccctgaa gctgatctgc accaccggca

     3961 agctgcccgt gccctggccc accctcgtga ccaccctggg ctacggcctg cagtgcttcg