- 规格:20μl质粒
- 启动子:CMV promoter
- 复制子:pUC Ori,F1 Ori,SV40 Ori
- 终止子:HSV TK poly(A) signal
- 质粒分类:哺乳细胞质粒;哺乳编辑质粒;干扰RNA质粒
- 质粒大小:5759bp
- 原核抗性:壮观霉素Spe
- 筛选标记:杀稻瘟菌素Blast
- 克隆菌株:DH5α等大肠杆菌
- 表达宿主:293T等哺乳细胞
- 诱导方式:无需诱导
- 5测序引物:pEGFP-C-5
- 3测序引物:HSVtk-pA-R:GTCTCCTTCCGTGTTTCAG
- 备注:可连入miRNA片段
- 质粒简介: pCDNA6.2-GW-EmGFP-miR-Control质粒是在pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR线性化载体的基础上连入了一个小片段而成。如果需要连入其它miRNA片段,可通过引物退火加酶切连接的方式连入。 转染后可立即表达 miRNA。 所表达的 miRNA 在核内经内源细胞机制(包括 Drosha 酶)加工后,转运至细胞质,由 Dicer 酶进一步加工)。 然后,完成加工的 miRNA 结合到 RISC,在此处其功能类似于 siRNA,使 mRNA 靶标被切割。
带有 EmGFP 的 BLOCK-iT™ Pol II miR RNAi 表达载体试剂盒将传统 RNAi 载体的优点(表达稳定并能够使用病毒导入)以及组织特异性表达和同一转录本多靶点抑制的功能集于一身。 带有 EmGFP 的 BLOCK-iT™ Pol II miR RNAi 表达载体试剂盒含有的 pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR 载体设计用于表达人工 miRNA,该 miRNA 经工程化改造,与目的基因序列有 100% 的同源性并能引起靶标分子的切割。 该载体包括内源性 miRNA 的侧翼序列和环序列,内源性 miRNA 可指导从较长的 Pol II 转录本 (pre-miRNA) 上切除工程化的 miRNA。 使用 一流的 BLOCK-iT RNAi Designer,超过 70% 的重组体能产生超过 70% 的抑制效率。 工程化 miRNA 的 Pol II 表达可实现:
在 CMV 即刻早期启动子作用下高效表达,可通过 MultiSite Gateway重组选择组织特异性启动子和其它受调控的启动子;
在 pcDNA™6.2-GW/EmGFP-miR 载体中同-顺反子表达 Emerald GFP (EmGFP) 报告基因,使 EmGFP 的表达与目的 miRNA 抑制活性之间具有极强的相关性;
与用于基因表达的多种 Invitrogen Gateway® 目的 (DEST) 载体兼容;包括用于稳定转导分裂细胞、非分裂细胞和原代细胞类型的慢病毒载体,用于染色体单位点整合的 Flp-In™ 系统,以及替代报告基因融合构建体;
可在同一转录本表达的工程化 miRNA 多于一种,从而可同时抑制多个基因并产生合成表型;- 质粒图谱1: png/1-1F91Z92401607.png
质粒序列: 点击查看序列