• 规格：20μl质粒
• 原核抗性：卡那霉素Kan
• 筛选标记：博来霉素Zeo
• 克隆菌株：大肠杆菌DB3.1
• 质粒简介：              pGTQL1211YN/pEarleyGate201-YN是一个GateWay法的植物BIFC双分子荧光质粒。
• 质粒图谱1： png/1-1G203124S42I.png

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LOCUS       Exported               12321 bp ds-DNA     circular SYN 03-DEC-2017

DEFINITION  synthetic circular DNA

FEATURES             Location/Qualifiers

     source          1..12321

                     /organism="synthetic DNA construct"

                     /mol_type="other DNA"

     misc_feature    1..25

                     /label=LB T-DNA repeat

                     /note="left border repeat from nopaline C58 T-DNA"

     terminator      111..363

                     /label=MAS terminator

                     /note="mannopine synthase terminator"

     CDS             complement(373..924)

                     /codon_start=1

                     /gene="Streptomyces hygroscopicus bar"

                     /product="phosphinothricin acetyltransferase"

                     /label=Zeo

                     /note="confers resistance to bialophos or phosphinothricin"

                     /translation="MSPERRPADIRRATEADMPAVCTIVNHYIETSTVNFRTEPQEPQE

                     WTDDLVRLRERYPWLVAEVDGEVAGIAYAGPWKARNAYDWTAESTVYVSPRHQRTGLGS

                     TLYTHLLKSLEAQGFKSVVAVIGLPNDPSVRMHEALGYAPRGMLRAAGFKHGNWHDVGF

                     WQLDFSLPVPPRPVLPVTEI"

     promoter        complement(930..1310)

                     /label=MAS promoter

                     /note="mannopine synthase promoter (Velten et al., 1984)"

     promoter        2306..2651

                     /label=CaMV 35S promoter

                     /note="strong constitutive promoter from cauliflower mosaic

                     virus"

     misc_feature    2681..2735

                     /label=TMV Omega

                     /note="translational enhancer from the tobacco mosaic virus

                     5'-leader sequence (Gallie et al., 1988)"

     CDS             2740..2766

                     /codon_start=1

                     /product="HA (human influenza hemagglutinin) epitope tag"

                     /label=HA

                     /translation="YPYDVPDYA"

     protein_bind    2770..2894

                     /gene="mutant version of attR"

                     /label=attR1

                     /bound_moiety="LR Clonase(TM)"

                     /note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"

     promoter        2919..2949

                     /label=lac UV5 promoter

                     /note="E. coli lac promoter with an ""up"" mutation"

     CDS             3003..3662

                     /codon_start=1

                     /gene="cat"

                     /product="chloramphenicol acetyltransferase"

                     /label=CmR

                     /note="confers resistance to chloramphenicol"

                     /translation="MEKKITGYTTVDISQWHRKEHFEAFQSVAQCTYNQTVQLDITAFL

                     KTVKKNKHKFYPAFIHILARLMNAHPEFRMAMKDGELVIWDSVHPCYTVFHEQTETFSS

                     LWSEYHDDFRQFLHIYSQDVACYGENLAYFPKGFIENMFFVSANPWVSFTSFDLNVANM

                     DNFFAPVFTMGKYYTQGDKVLMPLAIQVHHAVCDGFHVGRMLNELQQYCDEWQGGA"

     CDS             4004..4309

                     /codon_start=1

                     /gene="ccdB"

                     /product="CcdB, a bacterial toxin that poisons DNA gyrase"

                     /label=ccdB

                     /note="Plasmids containing the ccdB gene cannot be 

                     propagated in standard E. coli strains."

                     /translation="MQFKVYTYKRESRYRLFVDVQSDIIDTPGRRIVIPLASARLLSDK

                     VSRELYPVVHIGDESWRMMTTDMASVPVSVIGEEVADLSHRENDIKNAINLMFWGI"

     protein_bind    complement(4350..4474)

                     /gene="mutant version of attR"

                     /label=attR2

                     /bound_moiety="LR Clonase(TM)"

                     /note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"

     CDS             4494..5012

                     /codon_start=1

                     /product="N-terminal fragment of mVenus for use in 

                     bimolecular fluorescence complementation (BiFC) (Kodama and

                     Hu, 2010)"

                     /label=VN173

                     /translation="MVSKGEELFTGVVPILVELDGDVNGHKFSVSGEGEGDATYGKLTL

                     KFICTTGKLPVPWPTLVTTFGYGLQCFARYPDHMKQHDFFKSAMPEGYVQERTIFFKDD

                     GNYKTRAEVKFEGDTLVNRIELKGIDFKEDGNILGHKLEYNYNSHNVYIMADKQKNGIK

                     VNFKIRHNIE"

     terminator      5093..5800

                     /label=OCS terminator

                     /note="octopine synthase terminator"

     misc_feature    6044..6068

                     /label=RB T-DNA repeat

                     /note="right border repeat from nopaline C58 T-DNA"

     CDS             7368..7997

                     /codon_start=1

                     /product="stability protein from the Pseudomonas plasmid 

                     pVS1 (Heeb et al., 2000)"

                     /label=pVS1 StaA

                     /translation="MKVIAVLNQKGGSGKTTIATHLARALQLAGADVLLVDSDPQGSAR

                     DWAAVREDQPLTVVGIDRPTIDRDVKAIGRRDFVVIDGAPQAADLAVSAIKAADFVLIP

                     VQPSPYDIWATADLVELVKQRIEVTDGRLQAAFVVSRAIKGTRIGGEVAEALAGYELPI

                     LESRITQRVSYPGTAAAGTTVLESEPEGDAAREVQALAAEIKSKLI"

     CDS             8431..9498

                     /codon_start=1

                     /product="replication protein from the Pseudomonas plasmid 

                     pVS1 (Heeb et al., 2000)"

                     /label=pVS1 RepA

                     /translation="GRKPSGPVQIGAALGDDLVEKLKAAQAAQRQRIEAEARPGESWQA

                     AADRIRKESRQPPAAGAPSIRKPPKGDEQPDFFVPMLYDVGTRDSRSIMDVAVFRLSKR

                     DRRAGEVIRYELPDGHVEVSAGPAGMASVWDYDLVLMAVSHLTESMNRYREGKGDKPGR

                     VFRPHVADVLKFCRRADGGKQKDDLVETCIRLNTTHVAMQRTKKAKNGRLVTVSEGEAL

                     ISRYKIVKSETGRPEYIEIELADWMYREITEGKNPDVLTVHPDYFLIDPGIGRFLYRLA

                     RRAAGKAEARWLFKTIYERSGSAGEFKKFCFTVRKLIGSNDLPEYDLKEEAGQAGPILV

                     MRYRNLIEGEASAGS"

     rep_origin      9564..9758

                     /label=pVS1 oriV

                     /note="origin of replication for the Pseudomonas plasmid 

                     pVS1 (Heeb et al., 2000)"

     misc_feature    10102..10242

                     /label=bom

                     /note="basis of mobility region from pBR322"

     rep_origin      complement(10428..11016)

                     /direction=LEFT

                     /label=ori

                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 

                     replication"

     CDS             complement(11103..11897)

                     /codon_start=1

                     /gene="aphA-3"

                     /product="aminoglycoside phosphotransferase"

                     /label=KanR

                     /note="confers resistance to kanamycin"

                     /translation="MAKMRISPELKKLIEKYRCVKDTEGMSPAKVYKLVGENENLYLKM

                     TDSRYKGTTYDVEREKDMMLWLEGKLPVPKVLHFERHDGWSNLLMSEADGVLCSEEYED

                     EQSPEKIIELYAECIRLFHSIDISDCPYTNSLDSRLAELDYLLNNDLADVDCENWEEDT

                     PFKDPRELYDFLKTEKPEEELVFSHGDLGDSNIFVKDGKVSGFIDLGRSGRADKWYDIA

                     FCVRSIREDIGEEQYVELFFDLLGIKPDWEKIKYYILLDELF"

ORIGIN

        1 tggcaggata tattgtggtg taaacaaatt gacgcttaga caacttaata acacattgcg

       61 gacgttttta atgtactgaa ttaacgccga attaattcga gctcggatct gataatttat

      121 ttgaaaattc ataagaaaag caaacgttac atgaattgat gaaacaatac aaagacagat

      181 aaagccacgc acatttagga tattggccga gattactgaa tattgagtaa gatcacggaa

      241 tttctgacag gagcatgtct tcaattcagc ccaaatggca gttgaaatac tcaaaccgcc

      301 ccatatgcag gagcggatca ttcattgttt gtttggttgc ctttgccaac atgggagtcc

      361 aagattctgc agtcaaatct cggtgacggg caggaccgga cggggcggta ccggcaggct

      421 gaagtccagc tgccagaaac ccacgtcatg ccagttcccg tgcttgaagc cggccgcccg

      481 cagcatgccg cggggggcat atccgagcgc ctcgtgcatg cgcacgctcg ggtcgttggg

      541 cagcccgatg acagcgacca cgctcttgaa gccctgtgcc tccagggact tcagcaggtg

      601 ggtgtagagc gtggagccca gtcccgtccg ctggtggcgg ggggagacgt acacggtcga

      661 ctcggccgtc cagtcgtagg cgttgcgtgc cttccagggg cccgcgtagg cgatgccggc

      721 gacctcgccg tccacctcgg cgacgagcca gggatagcgc tcccgcagac ggacgaggtc

      781 gtccgtccac tcctgcggtt cctgcggctc ggtacggaag ttgaccgtgc ttgtctcgat

      841 gtagtggttg acgatggtgc agaccgccgg catgtccgcc tcggtggcac ggcggatgtc

      901 ggccgggcgt cgttctgggc tcatcgattc gatttggtgt atcgagattg gttatgaaat

      961 tcagatgcta gtgtaatgta ttggtaattt gggaagatat aataggaagc aaggctattt