• 规格：20μl质粒
• 原核抗性：壮观霉素Spe
• 筛选标记：遗传霉素G418
• 克隆菌株：大肠杆菌DB3.1
• 质粒简介：            pKGWFS7.1是一个植物细胞蛋白表达GateWay系列质粒。
• 质粒图谱1： png/1-1P122145143H2.png

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LOCUS       Exported               12986 bp ds-DNA     circular SYN 22-JAN-2018

FEATURES             Location/Qualifiers

     source          1..12986

                     /organism="synthetic DNA construct"

                     /mol_type="other DNA"

     misc_feature    75..99

                     /label=LB T-DNA repeat

                     /note="left border repeat from nopaline C58 T-DNA"

     terminator      192..444

                     /label=NOS terminator

                     /note="nopaline synthase terminator and poly(A) signal"

     CDS             complement(484..1278)

                     /codon_start=1

                     /gene="aph(3')-II (or nptII)"

                     /product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"

                     /label=Neo

                     /note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418 

                     (Geneticin(R))"

                     /translation="MIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGRP

                     VLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLLS

                     SHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPATCPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEHQ

                     GLAPAELFARLKARMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA

                     LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"

     promoter        complement(1312..1491)

                     /label=NOS promoter

                     /note="nopaline synthase promoter"

     protein_bind    1630..1754

                     /gene="mutant version of attR"

                     /label=attR1

                     /bound_moiety="LR Clonase(TM)"

                     /note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"

     promoter        1779..1809

                     /label=lac UV5 promoter

                     /note="E. coli lac promoter with an ""up"" mutation"

     CDS             1863..2522

                     /codon_start=1

                     /gene="cat"

                     /product="chloramphenicol acetyltransferase"

                     /label=CmR

                     /note="confers resistance to chloramphenicol"

                     /translation="MEKKITGYTTVDISQWHRKEHFEAFQSVAQCTYNQTVQLDITAFL

                     KTVKKNKHKFYPAFIHILARLMNAHPEFRMAMKDGELVIWDSVHPCYTVFHEQTETFSS

                     LWSEYHDDFRQFLHIYSQDVACYGENLAYFPKGFIENMFFVSANPWVSFTSFDLNVANM

                     DNFFAPVFTMGKYYTQGDKVLMPLAIQVHHAVCDGFHVGRMLNELQQYCDEWQGGA"

     CDS             2864..3169

                     /codon_start=1

                     /gene="ccdB"

                     /product="CcdB, a bacterial toxin that poisons DNA gyrase"

                     /label=ccdB

                     /note="Plasmids containing the ccdB gene cannot be 

                     propagated in standard E. coli strains."

                     /translation="MQFKVYTYKRESRYRLFVDVQSDIIDTPGRRMVIPLASARLLSDK

                     VSRELYPVVHIGDESWRMMTTDMASVPVSVIGEEVADLSHRENDIKNAINLMFWGI"

     protein_bind    complement(3210..3334)

                     /gene="mutant version of attR"

                     /label=attR2

                     /bound_moiety="LR Clonase(TM)"

                     /note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"

     CDS             3345..4058

                     /codon_start=1

                     /product="enhanced GFP"

                     /label=EGFP

                     /note="mammalian codon-optimized"

                     /translation="MVSKGEELFTGVVPILVELDGDVNGHKFSVSGEGEGDATYGKLTL

                     KFICTTGKLPVPWPTLVTTLTYGVQCFSRYPDHMKQHDFFKSAMPEGYVQERTIFFKDD

                     GNYKTRAEVKFEGDTLVNRIELKGIDFKEDGNILGHKLEYNYNSHNVYIMADKQKNGIK

                     VNFKIRHNIEDGSVQLADHYQQNTPIGDGPVLLPDNHYLSTQSALSKDPNEKRDHMVLL

                     EFVTAAGITLGMDELY"

     CDS             4068..5879

                     /codon_start=1

                     /gene="uidA (or gusA) from E. coli"

                     /product="beta-glucuronidase"

                     /label=GUS

                     /translation="MLRPVETPTREIKKLDGLWAFSLDRENCGIDQRWWESALQESRAI

                     AVPGSFNDQFADADFRNYAGNVWYQREVFIPKGWAGQRIVLRFDAVTHYGKVWVNNQEV

                     MEHQGGYTPFEADVTPYVIAGKSVRITVCVNNELNWQTIPPGMVITDENGKKKQSYFHD

                     FFNYAGIHRSVMLYTTPNTWVDDITVVTHVAQDCNHASVDWQVVANGDVSVELRDADQQ

                     VVATGQGTSGTLQVVNPHLWQPGEGYLYELCVTAKSQTECDIYPLRVGIRSVAVKGEQF

                     LINHKPFYFTGFGRHEDADLRGKGFDNVLMVHDHALMDWIGANSYRTSHYPYAEEMLDW

                     ADEHGIVVIDETAAVGFNLSLGIGFEAGNKPKELYSEEAVNGETQQAHLQAIKELIARD

                     KNHPSVVMWSIANEPDTRPQGAREYFAPLAEATRKLDPTRPITCVNVMFCDAHTDTISD

                     LFDVLCLNRYYGWYVQSGDLETAEKVLEKELLAWQEKLHQPIIITEYGVDTLAGLHSMY

                     TDMWSEEYQCAWLDMYHRVFDRVSAVVGEQVWNFADFATSQGILRVGGNKKGIFTRDRK

                     PKSAAFLLQKRWTGMNFGEKPQQGGKQ"

     misc_feature    6205..6229

                     /label=RB T-DNA repeat

                     /note="right border repeat from nopaline C58 T-DNA"

     CDS             7560..8189

                     /codon_start=1

                     /product="stability protein from the Pseudomonas plasmid 

                     pVS1 (Heeb et al., 2000)"

                     /label=pVS1 StaA

                     /translation="MKVIAVLNQKGGSGKTTIATHLARALQLAGADVLLVDSDPQGSAR

                     DWAAVREDQPLTVVGIDRPTIDRDVKAIGRRDFVVIDGAPQAADLAVSAIKAADFVLIP

                     VQPSPYDIWATADLVELVKQRIEVTDGRLQAAFVVSRAIKGTRIGGEVAEALAGYELPI

                     LESRITQRVSYPGTAAAGTTVLESEPEGDAAREVQALAAEIKSKLI"

     rep_origin      9759..9953

                     /label=pVS1 oriV

                     /note="origin of replication for the Pseudomonas plasmid 

                     pVS1 (Heeb et al., 2000)"

     misc_feature    10297..10438

                     /label=bom

                     /note="basis of mobility region from pBR322"

     rep_origin      complement(10624..11212)

                     /direction=LEFT

                     /label=ori

                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 

                     replication"

     CDS             complement(11458..12249)

                     /codon_start=1

                     /gene="aadA"

                     /product="aminoglycoside adenylyltransferase (Murphy, 

                     1985)"

                     /label=SmR

                     /note="confers resistance to spectinomycin and 

                     streptomycin"

                     /translation="MGEAVIAEVSTQLSEVVGVIERHLEPTLLAVHLYGSAVDGGLKPH

                     SDIDLLVTVTVRLDETTRRALINDLLETSASPGESEILRAVEVTIVVHDDIIPWRYPAK

                     RELQFGEWQRNDILAGIFEPATIDIDLAILLTKAREHSVALVGPAAEELFDPVPEQDLF

                     EALNETLTLWNSPPDWAGDERNVVLTLSRIWYSAVTGKIAPKDVAADWAMERLPAQYQP

                     VILEARQAYLGQEEDRLASRADQLEEFVHYVKGEITKVVGK"

ORIGIN

        1 tcggatgatg ggctgcctgt atcgagtggt gattttgtgc cgagctgccg gtcggggagc

       61 tgttggctgg ctggtggcag gatatattgt ggtgtaaaca aattgacgct tagacaactt

      121 aataacacat tgcggacgtt tttaatgtac tgaattaacg ccgaattgaa ttatcagctt

      181 gcatgccggt cgatctagta acatagatga caccgcgcgc gataatttat cctagtttgc

      241 gcgctatatt ttgttttcta tcgcgtatta aatgtataat tgcgggactc taatcataaa

      301 aacccatctc ataaataacg tcatgcatta catgttaatt attacatgct taacgtaatt

      361 caacagaaat tatatgataa tcatcgcaag accggcaaca ggattcaatc ttaagaaact

      421 ttattgccaa atgtttgaac gatctgcttg actctagcta gagtccgaac cccagagtcc

      481 cgctcagaag aactcgtcaa gaaggcgata gaaggcgatg cgctgcgaat cgggagcggc

      541 gataccgtaa agcacgagga agcggtcagc ccattcgccg ccaagctctt cagcaatatc

      601 acgggtagcc aacgctatgt cctgatagcg gtccgccaca cccagccggc cacagtcgat

      661 gaatccagaa aagcggccat tttccaccat gatattcggc aagcaggcat cgccgtgggt

      721 cacgacgaga tcctcgccgt cgggcatccg cgccttgagc ctggcgaaca gttcggctgg

      781 cgcgagcccc tgatgctctt cgtccagatc atcctgatcg acaagaccgg cttccatccg

      841 agtacgtgct cgctcgatgc gatgtttcgc ttggtggtcg aatgggcagg tagccggatc

      901 aagcgtatgc agccgccgca ttgcatcagc catgatggat actttctcgg caggagcaag

      961 gtgagatgac aggagatcct gccccggcac ttcgcccaat agcagccagt cccttcccgc

     1021 ttcagtgaca acgtcgagca cagctgcgca aggaacgccc gtcgtggcca gccacgatag

     1081 ccgcgctgcc tcgtcttgga gttcattcag ggcaccggac aggtcggtct tgacaaaaag

     1141 aaccgggcgc ccctgcgctg acagccggaa cacggcggca tcagagcagc cgattgtctg

     1201 ttgtgcccag tcatagccga atagcctctc cacccaagcg gccggagaac ctgcgtgcaa

     1261 tccatcttgt tcaatcatgc ctcgatcgag ttgagagtga atatgagact ctaattggat

     1321 accgagggga atttatggaa cgtcagtgga gcatttttga caagaaatat ttgctagctg

     1381 atagtgacct taggcgactt ttgaacgcgc aataatggtt tctgacgtat gtgcttagct

     1441 cattaaactc cagaaacccg cggctcagtg gctccttcaa cgttgcggtt ctgtcagttc