• 规格：10μl质粒
• 启动子：CaMV 35S promoter
• 质粒大小：9847bp
• 质粒标签：N-4×Myc，C-3×FLAG
• 原核抗性：卡那霉素Kan
• 筛选标记：潮霉素Hyg
• 质粒简介：        pCAMBIA35S-4×Myc-MCS-3×FLAG质粒是一个植物系列质粒。
• 质粒图谱1： png/1-1G011151555419.png

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LOCUS       Exported                9847 bp ds-DNA     circular SYN 11-OCT-2017

DEFINITION  synthetic circular DNA

KEYWORDS    pCAMBIA35S-4×Myc-MCS-3×FLAG

SOURCE      synthetic DNA construct

  ORGANISM  synthetic DNA construct

REFERENCE   1  (bases 1 to 9847)

  TITLE     Direct Submission

            http://www.fenghbio.cn

FEATURES             Location/Qualifiers

     source          1..9847

                     /organism="synthetic DNA construct"

                     /mol_type="other DNA"

     promoter        234..579

                     /label=CaMV 35S promoter

                     /note="strong constitutive promoter from cauliflower mosaic

                     virus"

     CDS             599..718

                     /codon_start=1

                     /product="3 tandem Myc epitope tags"

                     /label=4×Myc

                     /translation="EQKLISEEDLEQKLISEEDLEQKLISEEDLEQKLISEEDL"

     misc_feature    719..802

                     /label=MCS

                     /note="pUC18/19 multiple cloning site"

     CDS             803..868

                     /codon_start=1

                     /product="three tandem FLAG(R) epitope tags, followed by an

                     enterokinase cleavage site"

                     /label=3xFLAG

                     /translation="DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK"

     terminator      894..1146

                     /label=NOS terminator

                     /note="nopaline synthase terminator and poly(A) signal"

     misc_feature    1168..1192

                     /label=RB T-DNA repeat

                     /note="right border repeat from nopaline C58 T-DNA"

     CDS             2492..3121

                     /codon_start=1

                     /product="stability protein from the Pseudomonas plasmid 

                     pVS1 (Heeb et al., 2000)"

                     /label=pVS1 StaA

                     /translation="MKVIAVLNQKGGSGKTTIATHLARALQLAGADVLLVDSDPQGSAR

                     DWAAVREDQPLTVVGIDRPTIDRDVKAIGRRDFVVIDGAPQAADLAVSAIKAADFVLIP

                     VQPSPYDIWATADLVELVKQRIEVTDGRLQAAFVVSRAIKGTRIGGEVAEALAGYELPI

                     LESRITQRVSYPGTAAAGTTVLESEPEGDAAREVQALAAEIKSKLI"

     CDS             3555..4622

                     /codon_start=1

                     /product="replication protein from the Pseudomonas plasmid 

                     pVS1 (Heeb et al., 2000)"

                     /label=pVS1 RepA

                     /translation="GRKPSGPVQIGAALGDDLVEKLKAAQAAQRQRIEAEARPGESWQA

                     AADRIRKESRQPPAAGAPSIRKPPKGDEQPDFFVPMLYDVGTRDSRSIMDVAVFRLSKR

                     DRRAGEVIRYELPDGHVEVSAGPAGMASVWDYDLVLMAVSHLTESMNRYREGKGDKPGR

                     VFRPHVADVLKFCRRADGGKQKDDLVETCIRLNTTHVAMQRTKKAKNGRLVTVSEGEAL

                     ISRYKIVKSETGRPEYIEIELADWMYREITEGKNPDVLTVHPDYFLIDPGIGRFLYRLA

                     RRAAGKAEARWLFKTIYERSGSAGEFKKFCFTVRKLIGSNDLPEYDLKEEAGQAGPILV

                     MRYRNLIEGEASAGS"

     rep_origin      4688..4882

                     /label=pVS1 oriV

                     /note="origin of replication for the Pseudomonas plasmid 

                     pVS1 (Heeb et al., 2000)"

     misc_feature    5226..5366

                     /label=bom

                     /note="basis of mobility region from pBR322"

     rep_origin      complement(5552..6140)

                     /direction=LEFT

                     /label=ori

                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 

                     replication"

     CDS             complement(6227..7021)

                     /codon_start=1

                     /gene="aphA-3"

                     /product="aminoglycoside phosphotransferase"

                     /label=Kan

                     /note="confers resistance to kanamycin"

                     /translation="MAKMRISPELKKLIEKYRCVKDTEGMSPAKVYKLVGENENLYLKM

                     TDSRYKGTTYDVEREKDMMLWLEGKLPVPKVLHFERHDGWSNLLMSEADGVLCSEEYED

                     EQSPEKIIELYAECIRLFHSIDISDCPYTNSLDSRLAELDYLLNNDLADVDCENWEEDT

                     PFKDPRELYDFLKTEKPEEELVFSHGDLGDSNIFVKDGKVSGFIDLGRSGRADKWYDIA

                     FCVRSIREDIGEEQYVELFFDLLGIKPDWEKIKYYILLDELF"

     misc_feature    7446..7470

                     /label=LB T-DNA repeat

                     /note="left border repeat from nopaline C58 T-DNA"

     polyA_signal    7548..7722

                     /label=CaMV poly(A) signal

                     /note="cauliflower mosaic virus polyadenylation signal"

     CDS             complement(7762..8787)

                     /codon_start=1

                     /gene="aph(4)-Ia"

                     /product="aminoglycoside phosphotransferase from E. coli"

                     /label=Hyg

                     /note="confers resistance to hygromycin"

                     /translation="MKKPELTATSVEKFLIEKFDSVSDLMQLSEGEESRAFSFDVGGRG

                     YVLRVNSCADGFYKDRYVYRHFASAALPIPEVLDIGEFSESLTYCISRRAQGVTLQDLP

                     ETELPAVLQPVAEAMDAIAAADLSQTSGFGPFGPQGIGQYTTWRDFICAIADPHVYHWQ

                     TVMDDTVSASVAQALDELMLWAEDCPEVRHLVHADFGSNNVLTDNGRITAVIDWSEAMF

                     GDSQYEVANIFFWRPWLACMEQQTRYFERRHPELAGSPRLRAYMLRIGLDQLYQSLVDG

                     NFDDAAWAQGRCDAIVRSGAGTVGRTQIARRSAAVWTDGCVEVLADSGNRRPSTRPRAK

                     K"

     promoter        complement(8855..9532)

                     /label=CaMV 35S promoter (enhanced)

                     /note="cauliflower mosaic virus 35S promoter with a 

                     duplicated enhancer region"

     protein_bind    9723..9744

                     /label=CAP binding site

                     /bound_moiety="E. coli catabolite activator protein"

                     /note="CAP binding activates transcription in the presence 

                     of cAMP."

     promoter        9759..9789

                     /label=lac promoter

                     /note="promoter for the E. coli lac operon"

     protein_bind    9797..9813

                     /label=lac operator

                     /bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"

                     /note="The lac repressor binds to the lac operator to 

                     inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be 

                     relieved by adding lactose or 

                     isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."

ORIGIN

        1 agcagcttga gcttggatca gattgtcgtt tcccgccttc agtttagctt catggagtca

       61 aagattcaaa tagaggacct aacagaactc gccgtaaaga ctggcgaaca gttcatacag

      121 agtctcttac gactcaatga caagaagaaa atcttcgtca acatggtgga gcacgacaca

      181 cttgtctact ccaaaaatat caaagataca gtctcagaag accaaagggc aattgagact

      241 tttcaacaaa gggtaatatc cggaaacctc ctcggattcc attgcccagc tatctgtcac

      301 tttattgtga agatagtgga aaaggaaggt ggctcctaca aatgccatca ttgcgataaa

      361 ggaaaggcca tcgttgaaga tgcctctgcc gacagtggtc ccaaagatgg acccccaccc

      421 acgaggagca tcgtggaaaa agaagacgtt ccaaccacgt cttcaaagca agtggattga

      481 tgtgatatct ccactgacgt aagggatgac gcacaatccc actatccttc gcaagaccct

      541 tcctctatat aaggaagttc atttcatttg gagagaacac gggggactct tgaccatgga

      601 acaaaaacta atatcagagg aagatttgga acagaaacta atcagtgaag aagatttaga

      661 gcaaaagtta atttccgagg aggacttaga gcagaagttg atttcagaag aagatctggg

      721 gcccataggc ctgaattcga gctcggtacc cggggatcct ctagagtcga cctgcaggca

      781 tgcaagctta ctagtcacgc gtgactacaa agaccatgac ggtgattata aagatcatga

      841 catcgattac aaggatgacg atgacaagta aggtgaccag ctcgaatttc cccgatcgtt

      901 caaacatttg gcaataaagt ttcttaagat tgaatcctgt tgccggtctt gcgatgatta

      961 tcatataatt tctgttgaat tacgttaagc atgtaataat taacatgtaa tgcatgacgt

     1021 tatttatgag atgggttttt atgattagag tcccgcaatt atacatttaa tacgcgatag

     1081 aaaacaaaat atagcgcgca aactaggata aattatcgcg cgcggtgtca tctatgttac

     1141 tagatcggga attaaactat cagtgtttga caggatatat tggcgggtaa acctaagaga

     1201 aaagagcgtt tattagaata acggatattt aaaagggcgt gaaaaggttt atccgttcgt

     1261 ccatttgtat gtgcatgcca accacagggt tcccctcggg atcaaagtac tttgatccaa

     1321 cccctccgct gctatagtgc agtcggcttc tgacgttcag tgcagccgtc ttctgaaaac

     1381 gacatgtcgc acaagtccta agttacgcga caggctgccg ccctgccctt ttcctggcgt

     1441 tttcttgtcg cgtgttttag tcgcataaag tagaatactt gcgactagaa ccggagacat

     1501 tacgccatga acaagagcgc cgccgctggc ctgctgggct atgcccgcgt cagcaccgac

     1561 gaccaggact tgaccaacca acgggccgaa ctgcacgcgg ccggctgcac caagctgttt

     1621 tccgagaaga tcaccggcac caggcgcgac cgcccggagc tggccaggat gcttgaccac

     1681 ctacgccctg gcgacgttgt gacagtgacc aggctagacc gcctggcccg cagcacccgc

     1741 gacctactgg acattgccga gcgcatccag gaggccggcg cgggcctgcg tagcctggca

     1801 gagccgtggg ccgacaccac cacgccggcc ggccgcatgg tgttgaccgt gttcgccggc

     1861 attgccgagt tcgagcgttc cctaatcatc gaccgcaccc ggagcgggcg cgaggccgcc