• 规格：20μl质粒
• 启动子：T7/Laco promoter
• 复制子：pUC ori
• 终止子：T7 terminator
• 原核抗性：氨苄青霉素Amp
• 筛选标记：自杀基因ccdb
• 克隆菌株：大肠杆菌DB3.1
• 质粒简介：          pETG-30A是一个大肠杆菌pET系列表达质粒。
• 质粒图谱1： png/1-1G22G52GOQ.png

质粒序列： 点击查看序列

LOCUS       Exported                7784 bp ds-DNA     circular SYN 27-DEC-2017

DEFINITION  synthetic circular DNA

FEATURES             Location/Qualifiers

     source          1..7784

                     /organism="synthetic DNA construct"

                     /mol_type="other DNA"

     terminator      26..73

                     /label=T7 terminator

                     /note="transcription terminator for bacteriophage T7 RNA 

                     polymerase"

     CDS             complement(140..157)

                     /codon_start=1

                     /product="6xHis affinity tag"

                     /label=6xHis

                     /translation="HHHHHH"

     protein_bind    166..290

                     /gene="mutant version of attR"

                     /label=attR2

                     /bound_moiety="LR Clonase(TM)"

                     /note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"

     CDS             complement(331..636)

                     /codon_start=1

                     /gene="ccdB"

                     /product="CcdB, a bacterial toxin that poisons DNA gyrase"

                     /label=ccdB

                     /note="Plasmids containing the ccdB gene cannot be 

                     propagated in standard E. coli strains."

                     /translation="MQFKVYTYKRESRYRLFVDVQSDIIDTPGRRMVIPLASARLLSDK

                     VSRELYPVVHIGDESWRMMTTDMASVPVSVIGEEVADLSHRENDIKNAINLMFWGI"

     CDS             complement(978..1637)

                     /codon_start=1

                     /gene="cat"

                     /product="chloramphenicol acetyltransferase"

                     /label=Chl

                     /note="confers resistance to chloramphenicol"

                     /translation="MEKKITGYTTVDISQWHRKEHFEAFQSVAQCTYNQTVQLDITAFL

                     KTVKKNKHKFYPAFIHILARLMNAHPEFRMAMKDGELVIWDSVHPCYTVFHEQTETFSS

                     LWSEYHDDFRQFLHIYSQDVACYGENLAYFPKGFIENMFFVSANPWVSFTSFDLNVANM

                     DNFFAPVFTMGKYYTQGDKVLMPLAIQVHHAVCDGFHVGRMLNELQQYCDEWQGGA"

     promoter        complement(1691..1721)

                     /label=lac UV5 promoter

                     /note="E. coli lac promoter with an ""up"" mutation"

     protein_bind    complement(1746..1870)

                     /gene="mutant version of attR"

                     /label=attR1

                     /bound_moiety="LR Clonase(TM)"

                     /note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"

     CDS             complement(1886..2539)

                     /codon_start=1

                     /product="glutathione S-transferase from Schistosoma 

                     japonicum"

                     /label=GST

                     /translation="MSPILGYWKIKGLVQPTRLLLEYLEEKYEEHLYERDEGDKWRNKK

                     FELGLEFPNLPYYIDGDVKLTQSMAIIRYIADKHNMLGGCPKERAEISMLEGAVLDIRY

                     GVSRIAYSKDFETLKVDFLSKLPEMLKMFEDRLCHKTYLNGDHVTHPDFMLYDALDVVL

                     YMDPMCLDAFPKLVCFKKRIEAIPQIDKYLKSSKYIAWPLQGWQATFGGGDHPPK"

     CDS             complement(2558..2575)

                     /codon_start=1

                     /product="6xHis affinity tag"

                     /label=6xHis

                     /translation="HHHHHH"

     RBS             2588..2610

                     /note="efficient ribosome binding site from bacteriophage 

                     T7 gene 10 (Olins and Rangwala, 1989)"

     protein_bind    2625..2649

                     /label=lac operator

                     /bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"

                     /note="The lac repressor binds to the lac operator to 

                     inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be 

                     relieved by adding lactose or 

                     isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."

     promoter        complement(2650..2668)

                     /label=T7 promoter

                     /note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"

     promoter        2977..3054

                     /gene="lacI"

                     /label=lacI promoter

     CDS             3055..4137

                     /codon_start=1

                     /gene="lacI"

                     /product="lac repressor"

                     /label=lacI

                     /note="The lac repressor binds to the lac operator to 

                     inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be 

                     relieved by adding lactose or 

                     isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."

                     /translation="MKPVTLYDVAEYAGVSYQTVSRVVNQASHVSAKTREKVEAAMAEL

                     NYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKSRADQLGASVVVSMVERSGV

                     EACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNVPALFLDVSDQTPINSIIFSH

                     EDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGWHKYLTRNQIQPIAEREGDWSA

                     MSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITESGLRVGADISVVGYDDTEDSSC

                     YIPPLTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQLLPVSLVKRKTTLAPNTQTASPR

                     ALADSLMQLARQVSRLESGQ"

     CDS             4946..5137

                     /codon_start=1

                     /gene="rop"

                     /product="Rop protein, which maintains plasmids at low copy

                     number"

                     /label=rop

                     /translation="MTKQEKTALNMARFIRSQTLTLLEKLNELDADEQADICESLHDHA

                     DELYRSCLARFGDDGENL"

     misc_feature    5239..5381

                     /label=bom

                     /note="basis of mobility region from pBR322"

     rep_origin      complement(5567..6155)

                     /direction=LEFT

                     /label=ori

                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 

                     replication"

     CDS             complement(6326..7186)

                     /codon_start=1

                     /gene="bla"

                     /product="beta-lactamase"

                     /label=AmpR

                     /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and

                     related antibiotics"

                     /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI

                     ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS

                     PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW

                     EPELNEAIPNDERDTTMPAAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA

                     LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS

                     LIKHW"

     promoter        complement(7187..7291)

                     /gene="bla"

                     /label=AmpR promoter

     rep_origin      complement(7318..7773)

                     /direction=LEFT

                     /label=f1 ori

                     /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 

                     indicates direction of (+) strand synthesis"

ORIGIN

        1 atccggatat agttcctcct ttcagcaaaa aacccctcaa gacccgttta gaggccccaa

       61 ggggttatgc tagttattgc tcagcggtgg cagcagccaa ctcagcttcc tttcgggctt

      121 tgttagcagc cggatctcag tggtggtggt ggtggtgctc gagtcaccac tttgtacaag

      181 aaagctgaac gagaaacgta aaatgatata aatatcaata tattaaatta gattttgcat

      241 aaaaaacaga ctacataata ctgtaaaaca caacatatcc agtcactatg gtcgacctgc

      301 agactggctg tgtataaggg agcctgacat ttatattccc cagaacatca ggttaatggc

      361 gtttttgatg tcattttcgc ggtggctgag atcagccact tcttccccga taacggagac

      421 cggcacactg gccatatcgg tggtcatcat gcgccagctt tcatccccga tatgcaccac

      481 cgggtaaagt tcacgggaga ctttatctga cagcagacgt gcactggcca gggggatcac

      541 catccgtcgc ccgggcgtgt caataatatc actctgtaca tccacaaaca gacgataacg

      601 gctctctctt ttataggtgt aaaccttaaa ctgcatttca ccagtccctg ttctcgtcag

      661 caaaagagcc gttcatttca ataaaccggg cgacctcagc catcccttcc tgattttccg

      721 ctttccagcg ttcggcacgc agacgacggg cttcattctg catggttgtg cttaccagac

      781 cggagatatt gacatcatat atgccttgag caactgatag ctgtcgctgt caactgtcac

      841 tgtaatacgc tgcttcatag cacacctctt tttgacatac ttcgggtata catatcagta

      901 tatattctta taccgcaaaa atcagcgcgc aaatacgcat actgttatct ggcttttagt

      961 aagccggatc cacgcgttta cgccccgccc tgccactcat cgcagtactg ttgtaattca