• 规格：10μl质粒
• 原核抗性：卡那霉素Kan
• 克隆菌株：大肠杆菌DH5α
• 质粒简介：         pET系统是有史以来在大肠杆菌中表达重组蛋白的功能最强大的系统，也是现今原核表达方面使用最广泛的系统。该系列质粒能很容易的通过降低诱导物的浓度来削弱蛋白表达。在非诱导条件下，可以使目的基因处于完全沉默状态而不转录。
• 质粒图谱1： png/1-1G1230934422E.png

质粒序列： 点击查看序列

LOCUS       Exported                5926 bp ds-DNA     circular SYN 23-NOV-2017

DEFINITION  synthetic circular DNA

KEYWORDS    pET-49b

SOURCE      synthetic DNA construct

  ORGANISM  synthetic DNA construct

REFERENCE   1  (bases 1 to 5926)

            http://www.fenghbio.cn

FEATURES             Location/Qualifiers

     source          1..5926

                     /organism="synthetic DNA construct"

                     /mol_type="other DNA"

     terminator      26..73

                     /label=T7 terminator

                     /note="transcription terminator for bacteriophage T7 RNA 

                     polymerase"

     CDS             complement(168..212)

                     /codon_start=1

                     /product="affinity and epitope tag derived from pancreatic 

                     ribonuclease A"

                     /label=S-Tag

                     /translation="KETAAAKFERQHMDS"

     CDS             complement(213..230)

                     /codon_start=1

                     /product="thrombin recognition and cleavage site"

                     /label=thrombin site

                     /translation="LVPRGS"

     CDS             complement(309..332)

                     /codon_start=1

                     /product="recognition and cleavage site for human 

                     rhinovirus 3C and PreScission proteases"

                     /label=HRV 3C site

                     /translation="LEVLFQGP"

     CDS             complement(342..359)

                     /codon_start=1

                     /product="6xHis affinity tag"

                     /label=6xHis

                     /translation="HHHHHH"

     CDS             complement(435..1088)

                     /codon_start=1

                     /product="glutathione S-transferase from Schistosoma 

                     japonicum"

                     /label=GST

                     /translation="MSPILGYWKIKGLVQPTRLLLEYLEEKYEEHLYERDEGDKWRNKK

                     FELGLEFPNLPYYIDGDVKLTQSMAIIRYIADKHNMLGGCPKERAEISMLEGAVLDIRY

                     GVSRIAYSKDFETLKVDFLSKLPEMLKMFEDRLCHKTYLNGDHVTHPDFMLYDALDVVL

                     YMDPMCLDAFPKLVCFKKRIEAIPQIDKYLKSSKYIAWPLQGWQATFGGGDHPPK"

     protein_bind    1133..1157

                     /label=lac operator

                     /bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"

                     /note="The lac repressor binds to the lac operator to 

                     inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be 

                     relieved by adding lactose or 

                     isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."

     promoter        complement(1158..1176)

                     /label=T7 promoter

                     /note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"

     promoter        1489..1566

                     /gene="lacI"

                     /label=lacI promoter

     CDS             1567..2649

                     /codon_start=1

                     /gene="lacI"

                     /product="lac repressor"

                     /label=lacI

                     /note="The lac repressor binds to the lac operator to 

                     inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be 

                     relieved by adding lactose or 

                     isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."

                     /translation="MKPVTLYDVAEYAGVSYQTVSRVVNQASHVSAKTREKVEAAMAEL

                     NYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKSRADQLGASVVVSMVERSGV

                     EACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNVPALFLDVSDQTPINSIIFSH

                     EDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGWHKYLTRNQIQPIAEREGDWSA

                     MSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITESGLRVGADISVVGYDDTEDSSC

                     YIPPLTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQLLPVSLVKRKTTLAPNTQTASPR

                     ALADSLMQLARQVSRLESGQ"

     CDS             3221..3412

                     /codon_start=1

                     /gene="rop"

                     /product="Rop protein, which maintains plasmids at low copy

                     number"

                     /label=rop

                     /translation="MTKQEKTALNMARFIRSQTLTLLEKLNELDADEQADICESLHDHA

                     DELYRSCLARFGDDGENL"

     misc_feature    3514..3656

                     /label=bom

                     /note="basis of mobility region from pBR322"

     rep_origin      complement(3842..4430)

                     /direction=LEFT

                     /label=ori

                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 

                     replication"

     CDS             4552..5367

                     /codon_start=1

                     /product="aminoglycoside phosphotransferase"

                     /label=KanR

                     /note="confers resistance to kanamycin in bacteria or G418 

                     (Geneticin(R)) in eukaryotes"

                     /translation="MSHIQRETSCSRPRLNSNMDADLYGYKWARDNVGQSGATIYRLYG

                     KPDAPELFLKHGKGSVANDVTDEMVRLNWLTEFMPLPTIKHFIRTPDDAWLLTTAIPGK

                     TAFQVLEEYPDSGENIVDALAVFLRRLHSIPVCNCPFNSDRVFRLAQAQSRMNNGLVDA

                     SDFDDERNGWPVEQVWKEMHKLLPFSPDSVVTHGDFSLDNLIFDEGKLIGCIDVGRVGI

                     ADRYQDLAILWNCLGEFSPSLQKRLFQKYGIDNPDMNKLQFHLMLDEFF"

     rep_origin      complement(5460..5915)

                     /direction=LEFT

                     /label=f1 ori

                     /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 

                     indicates direction of (+) strand synthesis"

ORIGIN

        1 atccggatat agttcctcct ttcagcaaaa aacccctcaa gacccgttta gaggccccaa

       61 ggggttatgc tagttattgc tcagcggtgg cagcagccaa ctcagcttcc tttcgggctt

      121 tgtttagcag cctaggttaa ttaagcctcg agagcagcag aagtagagct gtccatgtgc

      181 tggcgttcga atttagcagc agcggtttct ttactaccgc gtggcaccag agcgagctct

      241 gcggccgcaa gcttgtcgac ggacgtcggg cgcgccaagg cctgtacaga attcggatcc

      301 tggtacccgg gtccctgaaa gaggacttca agagccgcgg agtgatggtg atggtgatga

      361 ccagaaccac tagatggagt aggagtagga ggattgttat tagaaccgcc accaccacta

      421 gttgaaccat ccgattttgg aggatggtcg ccaccaccaa acgtggcttg ccagccctgc

      481 aaaggccatg ctatatactt gctggatttc aagtacttat caatttgtgg gatagcttca

      541 atacgttttt taaaacaaac taattttggg aacgcatcca ggcacattgg gtccatgtat

      601 aaaacaacat caagagcgtc atacaacatg aagtcaggat gggttacatg atcaccattt

      661 aaatatgttt tatgacataa acgatcttcg aacattttca gcatttcagg tagcttgcta

      721 agaaaatcaa ctttgagagt ttcaaagtct ttactatatg caattctcga aacaccgtat

      781 ctaatatcca aaaccgctcc ttcaagcatt gaaatctctg cacgctcttt tggacaacca

      841 cccaacatgt tgtgcttgtc agctatataa cgtatgatgg ccatagactg tgttaattta

      901 acatcaccat caatataata aggaagattg ggaaactcca aacccaattc aaactttttg

      961 tttcgccatt tatcaccttc atcgcgctca tacaaatgct cttcatattt ttcttcaaga

     1021 tattccaaaa gaagtcgagt gggttgcaca aggcccttaa ttttccaata acctagtata

     1081 ggggacatat gtatatctcc ttcttaaagt taaacaaaat tatttctaga ggggaattgt

     1141 tatccgctca caattcccct atagtgagtc gtattaattt cgcgggatcg agatcgatct

     1201 cgatcctcta cgccggacgc atcgtggccg gcatcaccgg cgccacaggt gcggttgctg

     1261 gcgcctatat cgccgacatc accgatgggg aagatcgggc tcgccacttc gggctcatga

     1321 gcgcttgttt cggcgtgggt atggtggcag gccccgtggc cgggggactg ttgggcgcca

     1381 tctccttgca tgcaccattc cttgcggcgg cggtgctcaa cggcctcaac ctactactgg

     1441 gctgcttcct aatgcaggag tcgcataagg gagagcgtcg agatcccgga caccatcgaa

     1501 tggcgcaaaa cctttcgcgg tatggcatga tagcgcccgg aagagagtca attcagggtg

     1561 gtgaatgtga aaccagtaac gttatacgat gtcgcagagt atgccggtgt ctcttatcag

     1621 accgtttccc gcgtggtgaa ccaggccagc cacgtttctg cgaaaacgcg ggaaaaagtg

     1681 gaagcggcga tggcggagct gaattacatt cccaaccgcg tggcacaaca actggcgggc

     1741 aaacagtcgt tgctgattgg cgttgccacc tccagtctgg ccctgcacgc gccgtcgcaa

     1801 attgtcgcgg cgattaaatc tcgcgccgat caactgggtg ccagcgtggt ggtgtcgatg

     1861 gtagaacgaa gcggcgtcga agcctgtaaa gcggcggtgc acaatcttct cgcgcaacgc

     1921 gtcagtgggc tgatcattaa ctatccgctg gatgaccagg atgccattgc tgtggaagct

     1981 gcctgcacta atgttccggc gttatttctt gatgtctctg accagacacc catcaacagt

     2041 attattttct cccatgaaga cggtacgcga ctgggcgtgg agcatctggt cgcattgggt

     2101 caccagcaaa tcgcgctgtt agcgggccca ttaagttctg tctcggcgcg tctgcgtctg

     2161 gctggctggc ataaatatct cactcgcaat caaattcagc cgatagcgga acgggaaggc

     2221 gactggagtg ccatgtccgg ttttcaacaa accatgcaaa tgctgaatga gggcatcgtt

     2281 cccactgcga tgctggttgc caacgatcag atggcgctgg gcgcaatgcg cgccattacc

     2341 gagtccgggc tgcgcgttgg tgcggacatc tcggtagtgg gatacgacga taccgaagac

     2401 agctcatgtt atatcccgcc gttaaccacc atcaaacagg attttcgcct gctggggcaa

     2461 accagcgtgg accgcttgct gcaactctct cagggccagg cggtgaaggg caatcagctg

     2521 ttgcccgtct cactggtgaa aagaaaaacc accctggcgc ccaatacgca aaccgcctct

     2581 ccccgcgcgt tggccgattc attaatgcag ctggcacgac aggtttcccg actggaaagc