• 规格：20μl质粒
• 质粒分类：基因库质粒
• 原核抗性：卡那霉素Kan
• 克隆菌株：大肠杆菌DH5α
• 质粒简介：         pT7-His-AGK是一个人源基因大肠表达质粒。
• 质粒图谱1： png/8-1P129120202Z1.png

质粒序列： 点击查看序列

LOCUS       Exported                6550 bp ds-DNA     circular SYN 21-十二月-2016

FEATURES             Location/Qualifiers

     source          1..6550

                     /organism="synthetic DNA construct"

                     /mol_type="other DNA"

     promoter        141..159

                     /note="T7 promoter"

                     /note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"

     protein_bind    160..184

                     /bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"

                     /note="lac operator"

                     /note="The lac repressor binds to the lac operator to 

                     inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be 

                     relieved by adding lactose or 

                     isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."

     RBS             199..221

                     /note="efficient ribosome binding site from bacteriophage 

                     T7 gene 10 (Olins and Rangwala, 1989)"

     CDS             240..257

                     /codon_start=1

                     /product="6xHis affinity tag"

                     /note="6xHis"

                     /translation="HHHHHH"

     CDS             276..1544

                     /codon_start=1

                     /note="AGK"

                     /translation="MTVFFKTLRNHWKKTTAGLCLLTWGGHWLYGKHCDNLLRRAACQE

                     AQVFGNQLIPPNAQVKKATVFLNPAACKGKARTLFEKNAAPILHLSGMDVTIVKTDYEG

                     QAKKLLELMENTDVIIVAGGDGTLQEVVTGVLRRTDEATFSKIPIGFIPLGETSSLSHT

                     LFAESGNKVQHITDATLAIVKGETVPLDVLQIKGEKEQPVFAMTGLRWGSFRDAGVKVS

                     KYWYLGPLKIKAAHFFSTLKEWPQTHQASISYTGPTERPPNEPEETPVQRPSLYRRILR

                     RLASYWAQPQDALSQEVSPEVWKDVQLSTIELSITTRNNQLDPTSKEDFLNICIEPDTI

                     SKGDFITIGSRKVRNPKLHVEGTECLQASQCTLLIPEGAGGSFSIDSEEYEAMPVEVKL

                     LPRKLQFFCDPRKREQMLTSPTQ"

     CDS             complement(895..906)

                     /codon_start=1

                     /product="Factor Xa recognition and cleavage site"

                     /note="Factor Xa site"

                     /translation="IEGR"

     CDS             1551..1568

                     /codon_start=1

                     /product="6xHis affinity tag"

                     /note="6xHis"

                     /translation="HHHHHH"

     terminator      1635..1682

                     /note="T7 terminator"

                     /note="transcription terminator for bacteriophage T7 RNA 

                     polymerase"

     rep_origin      1719..2174

                     /direction=RIGHT

                     /note="f1 ori"

                     /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 

                     indicates direction of (+) strand synthesis"

     CDS             complement(2267..3082)

                     /codon_start=1

                     /product="aminoglycoside phosphotransferase"

                     /note="KanR"

                     /note="confers resistance to kanamycin in bacteria or G418 

                     (Geneticin(R)) in eukaryotes"

                     /translation="MSHIQRETSCSRPRLNSNMDADLYGYKWARDNVGQSGATIYRLYG

                     KPDAPELFLKHGKGSVANDVTDEMVRLNWLTEFMPLPTIKHFIRTPDDAWLLTTAIPGK

                     TAFQVLEEYPDSGENIVDALAVFLRRLHSIPVCNCPFNSDRVFRLAQAQSRMNNGLVDA

                     SDFDDERNGWPVEQVWKEMHKLLPFSPDSVVTHGDFSLDNLIFDEGKLIGCIDVGRVGI

                     ADRYQDLAILWNCLGEFSPSLQKRLFQKYGIDNPDMNKLQFHLMLDEFF"

     rep_origin      3204..3792

                     /direction=RIGHT

                     /note="pBR322 ori"

                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 

                     replication"

     misc_feature    3978..4120

                     /note="bom"

                     /note="basis of mobility region from pBR322"

     CDS             complement(4222..4413)

                     /codon_start=1

                     /gene="rop"

                     /product="Rop protein, which maintains plasmids at low copy

                     number"

                     /note="rop"

                     /translation="MTKQEKTALNMARFIRSQTLTLLEKLNELDADEQADICESLHDHA

                     DELYRSCLARFGDDGENL"

     CDS             complement(5222..6304)

                     /codon_start=1

                     /gene="lacI"

                     /product="lac repressor"

                     /note="lacI"

                     /note="The lac repressor binds to the lac operator to 

                     inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be 

                     relieved by adding lactose or 

                     isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."

                     /translation="MKPVTLYDVAEYAGVSYQTVSRVVNQASHVSAKTREKVEAAMAEL

                     NYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKSRADQLGASVVVSMVERSGV

                     EACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNVPALFLDVSDQTPINSIIFSH

                     EDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGWHKYLTRNQIQPIAEREGDWSA

                     MSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITESGLRVGADISVVGYDDTEDSSC

                     YIPPLTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQLLPVSLVKRKTTLAPNTQTASPR

                     ALADSLMQLARQVSRLESGQ"

     promoter        complement(6305..6382)

                     /gene="lacI"

                     /note="lacI promoter"

ORIGIN

        1 tcatgagccc gaagtggcga gcccgatctt ccccatcggt gatgtcggcg atataggcgc

       61 cagcaaccgc acctgtggcg ccggtgatgc cggccacgat gcgtccggcg tagaggatcg

      121 agatctcgat cccgcgaaat taatacgact cactataggg gaattgtgag cggataacaa

      181 ttcccctcta gaaataattt tgtttaactt taagaaggag atataccatg ggcagcagcc

      241 atcatcatca tcatcacagc agcggccgcg gatccatgac ggtgttcttt aaaacgcttc

      301 gaaatcactg gaagaaaact acagctgggc tctgcctgct gacctgggga ggccattggc

      361 tctatggaaa acactgtgat aacctcctaa ggagagcagc ctgtcaagaa gctcaggtgt

      421 ttggcaatca actcattcct cccaatgcac aagtgaagaa ggccactgtt tttctcaatc

      481 ctgcagcttg caaaggaaaa gctaggactc tatttgaaaa aaatgctgcc ccgattttac

      541 atttatctgg catggatgtg actattgtta agacagatta tgagggacaa gccaagaaac

      601 tcctggaact gatggaaaac acggatgtga tcattgttgc aggaggagat gggacactgc

      661 aggaggttgt tactggtgtt cttcgacgaa cagatgaggc taccttcagt aagattccca

      721 ttggatttat cccactggga gagaccagta gtttgagtca taccctcttt gccgaaagtg

      781 gaaacaaagt ccaacatatt actgatgcca cacttgccat tgtgaaagga gagacagttc

      841 cacttgatgt cttgcagatc aagggtgaaa aggaacagcc tgtatttgca atgaccggcc

      901 ttcgatgggg atctttcaga gatgctggcg tcaaagttag caagtactgg tatcttgggc

      961 ctctaaaaat caaagcagcc cactttttca gcactcttaa ggagtggcct cagactcatc

     1021 aagcctctat ctcatacacg ggacctacag agagacctcc caatgaacca gaggagaccc

     1081 ctgtacaaag gccttctttg tacaggagaa tattacgaag gcttgcgtcc tactgggcac

     1141 aaccacagga tgccctttcc caagaggtga gcccggaggt ctggaaagat gtgcagctgt

     1201 ccaccattga actgtccatc acaacacgga ataatcagct tgacccgaca agcaaagaag

     1261 attttctgaa tatctgcatt gaacctgaca ccatcagcaa aggagacttt ataactatag

     1321 gaagtcgaaa ggtgagaaac cccaagctgc acgtggaggg cacggagtgt ctccaagcca

     1381 gccagtgcac tttgcttatc ccggagggag cagggggctc ttttagcatt gacagtgagg

     1441 agtatgaagc gatgcctgtg gaggtgaaac tgctccccag gaagctgcag ttcttctgtg

     1501 atcctaggaa gagagaacag atgctcacaa gccccaccca gtgactcgag caccaccacc

     1561 accaccactg agatccggct gctaacaaag cccgaaagga agctgagttg gctgctgcca

     1621 ccgctgagca ataactagca taaccccttg gggcctctaa acgggtcttg aggggttttt

     1681 tgctgaaagg aggaactata tccggattgg cgaatgggac gcgccctgta gcggcgcatt

     1741 aagcgcggcg ggtgtggtgg ttacgcgcag cgtgaccgct acacttgcca gcgccctagc

     1801 gcccgctcct ttcgctttct tcccttcctt tctcgccacg ttcgccggct ttccccgtca

     1861 agctctaaat cgggggctcc ctttagggtt ccgatttagt gctttacggc acctcgaccc

     1921 caaaaaactt gattagggtg atggttcacg tagtgggcca tcgccctgat agacggtttt

     1981 tcgccctttg acgttggagt ccacgttctt taatagtgga ctcttgttcc aaactggaac

     2041 aacactcaac cctatctcgg tctattcttt tgatttataa gggattttgc cgatttcggc

     2101 ctattggtta aaaaatgagc tgatttaaca aaaatttaac gcgaatttta acaaaatatt

     2161 aacgtttaca atttcaggtg gcacttttcg gggaaatgtg cgcggaaccc ctatttgttt

     2221 atttttctaa atacattcaa atatgtatcc gctcatgaat taattcttag aaaaactcat

     2281 cgagcatcaa atgaaactgc aatttattca tatcaggatt atcaatacca tatttttgaa

     2341 aaagccgttt ctgtaatgaa ggagaaaact caccgaggca gttccatagg atggcaagat

     2401 cctggtatcg gtctgcgatt ccgactcgtc caacatcaat acaacctatt aatttcccct

     2461 cgtcaaaaat aaggttatca agtgagaaat caccatgagt gacgactgaa tccggtgaga

     2521 atggcaaaag tttatgcatt tctttccaga cttgttcaac aggccagcca ttacgctcgt

     2581 catcaaaatc actcgcatca accaaaccgt tattcattcg tgattgcgcc tgagcgagac

     2641 gaaatacgcg atcgctgtta aaaggacaat tacaaacagg aatcgaatgc aaccggcgca

     2701 ggaacactgc cagcgcatca acaatatttt cacctgaatc aggatattct tctaatacct

     2761 ggaatgctgt tttcccgggg atcgcagtgg tgagtaacca tgcatcatca ggagtacgga

     2821 taaaatgctt gatggtcgga agaggcataa attccgtcag ccagtttagt ctgaccatct

     2881 catctgtaac atcattggca acgctacctt tgccatgttt cagaaacaac tctggcgcat

     2941 cgggcttccc atacaatcga tagattgtcg cacctgattg cccgacatta tcgcgagccc