一、操作步骤:
1. 从-80℃冰箱中取出对应的感受态细胞,室温下置于冰盒上解冻,标记;
2. 向感受态细胞中加入2µl的质粒,置于4℃冰箱中,冰浴30min;
3. 在42℃水浴锅中热激1min,然后立即在冰盒上放置2min;
4. 每管加900µl LB培养基,37℃摇床震荡,150rpm×45min;
5. 取100µl 转化液加入对应抗性的平板中,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
6. 将平板倒置于37℃恒温培养箱中培养过夜。
二、注意事项:
1. 感受态可用灭菌的离心管分装使用。
2. 根据需要在第5步骤时将转化液6000rpm离心3min,然后只留下100µl左右的上清液,混匀沉淀,全部加入相对应的平板中。
3. 转化过程在超净工作台中进行.